MYC激活在多发性骨髓瘤髓外病变及疾病预后中的意义

摘要

背景和目的：多发性骨髓瘤是一种异质性较大的克隆性浆细胞肿瘤，通常进展缓慢。新诊断时合并髓外病变(EMD1)或治疗中出现髓外复发(EMD2)均提示肿瘤侵袭程度高，生存期缩短，预后差。近年来随着诊断方法敏感性不断提高，EMD发病率不断增加，但尚缺乏有效的治疗方案。而且EMD发病机制尚不明确，尤其缺乏有效的临床或实验室指标预测髓外复发。MYC基因异常激活认为与克隆性浆细胞恶性演变和MM肿瘤进展相关，而其在髓外病变和MM预后中的意义鲜有报道。本研究的主要目的包括:(1)总结EMD在MM中发病率、临床特征及细胞遗传异常，分析其可能相关的危险因素，并初步探讨可能有效的治疗方案。(2)研究MYC基因异常及蛋白表达水平与MM髓外病变的相关性，并探讨其在MM中的预后意义。(3)研究髓外浆细胞瘤及孤立性浆细胞瘤(SP)中细胞遗传学异常特征，探讨MM髓外病变可能的机制。
　　方法：回顾性分析2008年1月至2014年3月北京协和医院新诊断且随访资料完整的261例MM患者病例资料，统计分析EMD的发病率、临床特征、细胞遗传学异常及生存情况。并回顾性收集部分上述MM患者骨髓细胞悬液，采用荧光原位杂交(FISH)技术检测MYC异常的发生率、与髓外病变相关性及预后意义。收集部分上述患者中诊断EMD患者的骨髓或髓外肿瘤组织病理标本，同时选取部分上述nonEMD患者的骨髓病理标本及同期经北京协和医院诊断SP的肿瘤组织病理标本作为对照，采用免疫组化染色检测MYC蛋白表达水平，并分析其在髓外病变及疾病预后中的意义。采用组织荧光原位杂交分析髓外肿瘤组织中1q21扩增、8p21缺失、RB1缺失、D13S319缺失、P53缺失、IGH重排及MYC重排的发生率，并比较各种细胞遗传学异常在SP与EMD中的差异。
　　结果：
　　1.261例MM中EMD共计54例，髓外病变在初诊时发生率为13.0％，髓外复发中发生率11.1％。EMD与nonEMD相比，IgD型M蛋白(18.5％vs6.3％，P=0.012)、LDH升高者比例(27.5％vs7.3％，P＜0.001)、1q21扩增发生率（36.2％vs16.4％，P=0.003）、P53缺失发生率(17.0％vs5.8％，P=0.012)、RB1缺失发生率(42.6％vs25.4％，P=0.020)显著升高。LDH升高(P＜0.001，HR43.00)、P53缺失(P=0.025，HR3.41)、RB1缺失(P＜0.001，HR11.84)与髓外复发相关，而与诱导治疗方案是否采用硼替佐米(HR0.77)沙利度胺(HR0.44)无关。EMD预后较nonEMD总生存期明显缩短（中位生存期26个月vs41个月，P=0.008），尤其EMD2组的中位生存期为15个月，较 nonEMD MM组其生存期显著缩短（P＜0.001）。亚组分析显示以硼替佐米为诱导治疗的EMD患者与nonEMD患者总生存期无明显差异（中位生存期28个月vs39个月，P=0.237），以非硼替佐米为诱导治疗的EMD中位生存期为24个月，而nonEMD中位生存期未达（中位随访时间25个月），存在显著差异（P=0.007）。
　　2.共计53例初诊MM和17例复发MM行骨髓FISH检测MYC基因重排，MYC异常在初治和复发患者中的阳性率分别为22.6％和29.5％。53例初诊MM中，nonEMD患者MYC阳性率为9.1％(2/22)，EMD患者阳性率为32.3％(10/31)，两者间存在统计学差异（P=0.047）。MYC异常与1q21扩增存在显著相关性（P＜0.001），同时也与IGH(P=0.028)，TP53缺失(P=0.046)，D13S319（P=0.027）缺失，LDH升高相关（P=0.037）。MYC重排阳性者中位生存期为12个月，MYC重排阴性者中位生存期未达（中位随访时间为31个月），两者总生存期存在显著差异(P＜0.001)。多因素分析发现MYC重排阳性为MM预后差的独立危险因素（P＜0.001）。
　　3.共计24例EMD及11例SP行髓外浆细胞瘤组织FISH检测，EMD中1q21扩增（70.5％vs0％，P=0.001）、MYC异常（55.0％vs9.1％，P=0.024）、RB1缺失（66.7％vs20.0％，P=0.023）、IGH异常(62.5％vs10.0％，P=0.014)阳性率均显著高于SP患者。
　　4.共计54例初诊MM行MYC免疫组化检测，其中EMD组MYC组化中至强阳性患者比例显著高于nonEMD组(P=0.032)。两例MYC组化强阳性的SP患者均随访过程中均进展为MM，诊断至进展时间分别为1年和3年。MYC表达阳性比例＞30％者中位生存期为16个月，MYC表达阳性比例≤30％中位生存期未达（中位随访时间为31个月），两者总生存期存在显著差异（P=0.006）。
　　结论：MM患者中，LDH升高、P53缺失、MYC异常与髓外侵犯相关。MM患者出现EMD较nonEMD预后差，硼替佐米可部分克服EMD的不良预后。MYC重排具有预后意义，提示MM预后不良。

目录

摘要

第一部分 多发性骨髓瘤髓外病变临床特征及预后分析

引言

病例与方法

一、研究对象

二、研究方法

三、统计学处理

结果

讨论

结论

第二部分 MYC在多发性骨髓瘤髓外病变及预后中的意义

引言

材料和方法

一、研究对象

二、试剂及设备

三、实验方法

四、统计学处理

结果

一、MYC基因MM患者髓内异常水平及意义

二、MYC基因在髓外肿瘤中异常水平及意义

三、MYC蛋白在MM患者中表达水平及意义

讨论

结论

参考文献

附录

综述 MYC激活在多发性骨髓瘤克隆演变及临床预后中的意义

致谢

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