保加利亚乳杆菌产D-乳酸碳代谢途径改造

目录

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第一章 文献综述

1.1 D-乳酸

1.1.1 D-乳酸的结构及性质

1.1.2 D-乳酸的应用

1.1.3 D-乳酸的生产方法

1.2 木质纤维素

1.2.1 木质纤维素预处理方法

1.2.2 木质纤维素中木糖的利用

1.3 乳酸菌基因编辑技术

1.3.1 同源重组基因敲除

1.3.2 基因组编辑技术

1.4 研究目的及意义

1.5 技术路线

第二章 保加利亚乳杆菌产D-乳酸相关碳代谢途径分析

2.1材料与方法

2.1.1菌种

2.1.2培养基及配置试剂

2.1.3实验仪器

2.1.4实验试剂

2.1.5实验所用引物

2.1.6实验方法

2.2 结果

2.2.1 菌种鉴定

2.2.2 代谢途径分析

2.3讨论

2.4小结

第三章 德式乳杆菌保加利亚亚种代谢途径改造产D-乳酸

3.1 材料与方法

3.1.1菌种与质粒

3.1.2 实验试剂

3.1.3 实验仪器

3.1.4 培养基与缓冲液的配制

3.1.5 德氏乳杆菌保加利亚亚种ldb0094 基因敲除载体构建

3.1.6 德氏乳杆菌保加利亚亚种ldb0120 基因敲除载体构建

3.1.7 德氏乳杆菌保加利亚亚种Ack基因敲除载体构建

3.1.8 德氏乳杆菌保加利亚亚种Ack、ldb0094 及ldb0120 基因的敲除

3.2 结果

3.2.1 ldb0094 基因上下游同源臂的扩增与拼接结果

3.2.2 克隆载体pMD19-T-Δldb0094的构建

3.2.3 敲除载体pG+host4-Δldb0094的构建

3.2.4敲除载体pG+host4-Δldb0120∷ldhA的构建

3.2.5 Ack基因上下游同源臂的扩增与拼接结果

3.2.6 克隆载体pMD19-T-ΔAck的构建

3.2.7敲除载体pG+host4-ΔAck的构建

3.2.8敲除载体电转乳酸菌结果

3.3 讨论

3.4 小结

第四章 德氏乳杆菌保加利亚亚种木糖利用菌种的构建

4.1 材料与方法

4.1.1 菌种与质粒

4.1.2 试剂与实验仪器

4.1.3 培养基与缓冲液

4.1.4 德氏乳杆菌保加利亚亚种木糖利用关键酶表达载体构建

4.1.5 表达载体转化保加利亚乳杆菌

4.2 结果

4.2.1 大肠杆菌基因组DNA的提取

4.2.2 木糖利用关键酶基因xylAB序列的扩增

4.2.3 克隆载体pEASY-T1-xylAB构建结果

4.2.4 表达载体pMG36e-xylAB构建结果

4.2.5 表达载体转化构建保加利亚乳杆菌结果

4.3 讨论

4.4 小结

结 论

参考文献

作者简介

致谢