铁皮石斛多糖体外抗氧化活性的研究

摘要

石斛为我国传统中药材，其药用价值为人们所共识。经研究发现，多糖是石斛属植物的主要活性成分。本文以石斛之上品-铁皮石斛-为主要研究对象，对铁皮石斛总多糖(DSP)进行了提取和分级分离，测定了铁皮石斛总多糖及分级多糖的分子量，研究了铁皮石斛及分级多糖抗氧化活性。为石斛的生产与使用提供了依据，并且为铁皮石斛多糖构效关系的深入研究奠定了基础。获得的主要结果如下： 1.铁皮石斛总多糖的分离及其分子量的测定 采用分步醇沉法对铁皮石斛总多糖进行分离，分别得到40％醇沉多糖(DSP3)，70％醇沉多糖(DSP2)和90％醇沉多糖(DSP1)。 用凝胶层析法测定了铁皮石斛总多糖及分级多糖分子量，得到DSP、DSP1、DSP2、DSP3的分子量范围分别为1.57×104～15.7×104Da、1.48×104 Da、3.53×104～7.44×104 Da、11.51×104～15.7×104Da。 2.铁皮石斛总多糖及分级多糖抗氧化活性的研究 本文分别采用清除活性氧和DPPH自由基体系，金属离子螯合体系、还原力体系、Fe2+-Vc诱导的小鼠肝匀浆脂质过氧化体系、ABTS法测总抗氧化能力体系、抑制H2O2诱导红细胞氧化溶血能力体系和对羟基自由基介导的DNA损伤的保护体系，利用分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法分别对铁皮石斛多糖DSP、DSP1、DSP2、DSP3的体外抗氧化活性进行测定。结果表明，除在清除O2-·自由基体系中4种多糖无抗氧化作用外，在其它体系中均表现出较强的抗氧化能力，并具有显著的量效关系，但抗氧化体系不同，其抗氧化活性差异显著。DSP1对DPPH·的清除作用、还原力、对Fe2+-Vc诱导的小鼠肝匀浆脂质过氧化抑制作用、ABTS总抗氧化能力和抑制H2O2诱导红细胞氧化溶血作用效果最佳；DSP对·OH的清除率和金属螯合力最大；DSP3对H2O2和NO的清除作用的清除率最大；4种多糖均可显著抑制羟基自由基介导的DNA氧化断裂。 综上所述：4种铁皮石斛多糖均具有不同程度的抗氧化活性，表明，铁皮石斛多糖抗氧化活性大小与其分子量有关，还可能与铁皮石斛多糖的结构有关，其机制有待更深一步探讨。

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文摘

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致谢

第一章前言

1.1多糖抗氧化活性的评价方法

1.1.1抗氧化活性评价体系应该注意的问题

1.1.2抗氧化活性分析评价的方法

1.2论文研究的目的和意义

1.3论文主要研究内容和技术路线

1.3.1主要研究内容

1.3.2主要技术路线

第二章材料与方法

2.1材料

2.2主要试剂

2.3主要仪器

2.4主要实验方法

2.4.1铁皮石斛多糖及分离多糖的制备

2.4.2铁皮石斛总多糖及分离多糖分子量的测定

2.4.3铁皮石斛多糖体外抗氧化活性的测定方法

2.5数据处理

第三章结果与分析

3.1铁皮石斛总多糖及分级多糖分子量的测定

3.1.1分子量测定标准曲线

3.1.2铁皮石斛多糖的分子量分布

3.2不同分子量铁皮石斛多糖体外抗氧化活性的测定

3.2.1不同分子量多糖对羟基自由基(·OH)清除活性的影响

3.2.2不同分子量多糖对DPPH·自由基清除活性的影响

3.2.3不同分子量多糖对金属螯合能力的影响

3.2.4不同分子量对Fe2+-Vc诱导小鼠肝组织匀浆脂质过氧化的影响

3.2.5不同分子量多糖对NO的清除能力的影响

3.2.6不同分子量多糖对H2O2清除能力的影响

3.2.7不同分子量多糖对还原力的影响

3.2.8不同分子量多糖对ABTS法测总抗氧化能力的影响

3.2.9不同分子量多糖对超氧阴离子自由基(O2-·)的清除作用

3.2.10不同分子量多糖对H2O2诱导红细胞氧化溶血的影响

3.2.11不同分子量多糖对羟基自由基介导的DNA损伤的保护作用

第四章讨论

第五章结论与展望

5.1结论

5.2展望

参考文献