松口蘑菌株紫外诱变育种、培养条件优化及多糖抗氧化活性研究

摘要

松口蘑(TricholomaMatsutake)，又名松菌、松覃、松茸。松口蘑属担子菌亚门，层菌纲，伞菌目，口蘑科，口蘑属。松口蘑菇体肥厚，香气宜人，肉质非常鲜美，有很高的营养价值与药用价值，据文献记载，松口蘑具有强身、补肾壮阳、益肠胃、理气、化痰和驱虫等功效。现代医学表明，松口蘑还具有治疗糖尿病和抑制癌细胞增殖等作用，日本人称之为“菇中之王”。
　　本实验对松口蘑(Tricholomamatsutake)菌株进行紫外诱变处理，将菌丝体生长快且茂盛的诱变菌株进行初筛，比较菌丝体生长量，选育出在液体培养条件下生物量明显高于原始菌株的诱变株。松口蘑菌丝体经紫外线照射20秒，致死率即达76％。探讨了松口蘑最适的液体发酵培养基和培养的条件，结果表明:适宜温度为25℃，摇瓶装液量为140ml/500ml，接种量为10％～15％，起始pH为5～6，摇瓶转速为180r/min，菌丝生物量达2.05g/100ml。通过体外抗氧化实验(超阳阴离子自由基(O2-·)体系、过氧化氢自由基(·OH)体系、DPPH自由基体系），研究了松口蘑多糖的抗氧化活性，结果表明松口蘑多糖具有一定的抗氧化活性。一定浓度范围内，随着浓度增加，抗氧化活性逐渐增强，并且成有效的量-效关系。实验表明，当多糖浓度为0.8mg/ml时，松口蘑多糖对氧化氢自由基(·OH)清除率高达70.57％。将其应用于抗氧化保健食品的研究，可以减少自由基对机体产生损伤或致突变作用，具有良好的开发前景。

目录

声明

摘要

致谢

第一章 绪论

1．1 松口蘑概述

1．2 松口蘑的成分分析

1．2．1 多糖类物质

1．2．2 蛋白质、多肽、氨基酸类物质

1．2．3 挥发性物质

1．2．4 维生素和矿物质

1．3 松口蘑的药用价值及临床作用

1．3．1 松口蘑的抗菌、抗炎作用

1．3．2 松口蘑的抗肿瘤作用

1．3．3 松口蘑的增强机体免疫力功能

1．3．4 松口蘑的抗辐射作用

1．3．5 松口蘑的抗衰老作用

1．3．6 松口蘑美白作用

1．3．7 松口蘑的其他功能

1．4 松口蘑研究意义

1．5 本文主要研究内容

第二章 松口蘑菌株紫外诱变育种

2．1 前言

2．2 材料与方法

2．2．1 供试菌种

2．2．2 主要试剂

2．2．3 主要仪器

2．2．4 培养基

2．2．5 培养条件

2．2．6 种子扩大培养

2．2．7 紫外诱变育种

2．3 结果与讨论

2．3．1 紫外诱变育种

2．3．2 诱变菌株的菌体生长筛选

2．4 本章小结

第三章 液体培养条件优化

3．1 前言

3．2 材料与方法

3．2．1 供试菌种

3．2．2 主要试剂

3．2．3 主要仪器

3．2．4 液体培养基

3．2．5 实验方法

3．3 结果与讨论

3．3．1 温度对菌丝和多糖产量的影响

3．3．2 接种量对菌丝和多糖产量的影响

3．3．3 装液量对菌丝和多糖产量的影响

3．3．4 培养基起始pH对菌丝和多糖产量的影响

3．3．5 摇床转速对菌丝和多糖产量的影响

3．3．6 培养时间对菌丝和多糖产量的影响

3．3．7 正交实验结果

3．4 本章小结

第四章 松口蘑多糖体外抗氧化活性研究

4．1 前言

4．2 材料与方法

4．2．1 主要试剂

4．2．2 主要仪器

4．2．3 实验方法

4．3 结果与讨论

4．3．1 松口蘑多糖对O2-·的清除作用

4．3．2 松口蘑多糖对·OH的清除作用

4．3．3 松口蘑多糖对DPPH·的清除作用

4．4 本章小结

第五章 松口蘑多糖体内抗氧化活性研究

5．1 前言

5．2 材料与方法

5．2．1 试剂和实验动物

5．2．2 主要仪器

5．2．3 实验方法

5．3 结果和讨论

5．3．1 血清和组织中蛋白质含量

5．3．2 血清和组织中的SOD活性

5．3．3 血清和组织中的GSH-Px活性

5．3．4 血清和组织的MDA含量

5．3．5 血清和组织的TAOC值

5．4 本章小结

总结

参考文献

攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况