淋系抗原CD19、CD56在急性髓系白血病RUNX1-RUNX1T1突变患者中的表达及临床意义

摘要

背景及目的：
　　急性髓系白血病是一类生存率较低的异质性疾病，白血病分化抗原（CD）分为淋系抗原和髓系抗原，有部分AML存在淋系抗原的表达，称为跨系表达。RUNX1-RUNX1T1+的AML是一类预后较好的急性白血病，但仍有部分患者预后不佳。本次研究探讨AML的跨淋系表达在RUNX1-RUNX1T1+AML中的意义及其对预后的影响。
　　方法：
　　1.骨髓细胞学检查：采集患者采集患者骨髓标本1ml，制骨髓涂片5-8片，常规细胞瑞氏染色+缓冲液1:2染色，光学显微镜观察骨髓细胞形态，并计数500个有核细胞，最后依据FAB协作组AML的形态学诊断标准进行分型。
　　2.流式细胞术检查：采用EDTA抗凝，取2ml骨髓做流式标本，标本采集后立即送流式细胞室，加入的荧光抗体标记后1小时内上机检测。CD抗原＞20％判断为阳性表达。
　　3.RUNX1-RUNX1T1基因检测：采集2ml骨髓EDTA抗凝后，提取骨髓白细胞，TRIZOL冻存后提取RNA，加样后RQ-RCR仪上机检测，根据标准品的标准曲线计算未知的RUNX1-RUNX1T1基因量。
　　4.染色体检测：采集2ml骨髓，肝素抗凝采用24/48小时短期骨髓培养法， G显带显色，镜检正常核型者至少分析20个分裂相，异常核型者至少分析10个分裂相，2个以上具有相同核型异常定为异常克隆。
　　结果：
　　1.在200例急性髓系白血病患者中，淋系抗原CD19和CD56的表达率分别为9%和11%。
　　2.在200例急性髓系白血病患者，RUNX1-RUNX1T1阳性的有30例，并且存在染色体t(8;21)突变。
　　3.在30例RUNX1-RUNX1T1阳性的急性髓系白血病患者中，淋系抗原CD19和CD56的表达率分别为40%和50%,远高于RUNX1-RUNX1T1-的急性髓系白血病患者CD19的表达率3%和CD56的表达率4%(P＜0.05）。
　　4.在30例RUNX1-RUNX1T1阳性的急性髓系白血病患者中，CD19+的患者初次诱导缓解率为75%高于CD19-患者初次诱导缓解率16.7%(P＜0.05），CD56+的患者初次诱导缓解率7%为低于CD56-初次诱导缓解率67%(P＜0.05）。
　　5.在30例RUNX1-RUNX1T1阳性的急性髓系白血病患者中，CD19+中位生存期12个月，CD19-的患者中位生存期6个月，总生存曲线无显著差异。而 CD56+中位生存期6个月， CD56-中位生存期16个月。总生存曲线差异有统计学意义(P=0.0029＜0.05)。
　　结论：
　　1. CD19和CD56可作为提示AML中存在RUNX1-RUNX1T1突变的重要淋系标志物。
　　2. CD19阳性的RUNX1-RUNX1T1+患者有着较好的初次诱导缓解率，但长期生存率无差异。
　　3.CD56阳性的 RUNX1-RUNX1T1+患者初次诱导缓解率及长期生存率均较低。可作为AML的预后不良因素之一。

目录

声明

中英文缩略词表

1前言

2实验流程

3材料与方法

3.1研究对象

3.2标本处理

3.3试剂及设备

3.4实验方法与步骤:

4结果

4.1 200例急性髓系白血病患者的基本情况

4.2 急性髓系白血病AML的骨髓细胞学检测结果

4.4 RUNX1-RUNX1T1基因突变检测结果

4.5 RUNX1-RUNX1T1突变阳性患者淋系抗原的表达情况。

4.6 RUNX1-RUNX1T1+患者中淋系抗原 CD19 和 CD56 的表达明显高于RUNX1-RUNX1T1-AML 患者

4.7各组患者预后及生存情况的比较

5讨论

6结论

参考文献

附录

致谢

综述:急性髓系白血病免疫治疗的研究进展