松仁多糖结构表征及对化学性肝损伤防护作用机制研究

目录

第1 章绪 论

1.1课题背景及研究目的和意义

1.2植物多糖的研究进展

1.2.1植物多糖的提取

1.2.2植物多糖的分离纯化

1.2.3植物多糖的结构表征

1.2.4植物多糖的体外模拟消化

1.3化学性肝损伤的研究进展

1.3.1化学性肝损伤的分类

1.3.2化学性肝损伤的损伤机理

1.4植物多糖对化学性肝损伤的防护作用研究进展

1.4.1植物多糖对四氯化碳诱导肝损伤的防护作用

1.4.2植物多糖对酒精性肝损伤的防护作用

1.4.3植物多糖对对乙酰氨基酚诱导肝损伤的防护作用

1.5红松松仁活性成分及生理功能研究进展

1.5.1红松松仁活性成分及其生理功能

1.5.2红松松仁多糖的生理活性研究进展

1.6主要研究内容

第2 章实验材料与方法

2.1.1实验原料

2.1.2实验试剂及药品

2.1.3仪器设备

2.2.1原材料预处理

2.2.2松仁多糖提取工艺优化

2.2.3松仁多糖分离纯化

2.2.4松仁多糖保肝组分活性跟踪

2.3.1松仁多糖成分分析

2.3.2松仁多糖结构鉴定

2.3.3松仁多糖形貌特征

2.4松仁多糖体外模拟消化

2.4.1体外唾液消化

2.4.2体外模拟胃消化

2.4.3体外模拟肠消化

2.5松仁多糖对化学性肝损伤防护作用筛选

2.5.1化学性肝损伤细胞模型建立

2.5.2 PNP40c-1 体外消化产物对化学性肝损伤体外防护作用比较

2.6 PNP40c-1 对四氯化碳诱导肝损伤的体外防护作用

2.6.1 PNP40c-1 对 L-02 细胞抗氧化能力的影响

2.6.2 PNP40c-1 对 L-02 细胞凋亡的影响

2.6.3 PNP40c-1 对体外炎症反应的影响

2.6.4 PNP40c-1 对细胞 mRNA 表达的影响

2.7.1四氯化碳诱导肝损伤小鼠模型的建立

2.7.2 PNP40c-1 对小鼠脏器指标的影响

2.7.3 PNP40c-1 对肝脏组织形态的影响

2.7.4 PNP40c-1 对肝脏生化指标的影响

2.7.5 PNP40c-1 对血清生化指标的影响

2.7.6 PNP40c-1 对小鼠肝脏 mRNA 表达的影响

2.7.7 PNP40c-1 对小鼠肝脏中蛋白表达的影响

2.8数据统计与分析

第3 章松仁多糖的分离纯化及结构表征

3.1 引 言

3.2松仁多糖的提取工艺优化

3.2.1单因素水平的确定

3.2.2响应面法优化多糖提取工艺

3.3松仁多糖的分离纯化

3.3.1 DEAE-52 离子交换层析

3.3.2 Sephacryl S400 丙烯葡聚糖凝胶层析

3.4松仁多糖的体外活性跟踪

3.5 PNP40c-1 的结构表征

3.5.1 PNP40c-1 的成分分析

3.5.2 PNP40c-1 的平均分子量及纯度

3.5.3 PNP40c-1 的红外光谱分析

3.5.4 PNP40c-1 的部分酸水解

3.5.5 PNP40c-1 的高碘酸氧化和 Smith 降解

3.5.6 PNP40c-1 的甲基化分析

3.5.7 PNP40c-1 的核磁共振分析

3.5.8 PNP40c-1 的形貌特征

3.6本章小结

第4 章 PNP40c-1 对化学性肝损伤的体外防护作用

4.1 引 言

4.2 PNP40c-1 体外模拟消化

4.2.1体外模拟消化前后PNP40c-1平均分子量的变化

4.2.2 PNP40c-1 体外模拟消化产物中还原糖含量的变化

4.2.3 PNP40c-1 体外模拟消化产物中游离单糖含量

4.3 PNP40c-1 对化学性肝损伤的体外防护作用比较

4.3.1化学性肝损伤细胞模型的建立

4.3.2 PNP40c-1 对 L-02 细胞存活率的影响

4.3.3 PNP40c-1 对 L-02 细胞转氨酶活力的影响

4.4 PNP40c-1 对四氯化碳诱导肝损伤的体外防护作用

4.4.1 PNP40c-1 对 L-02 细胞抗氧化系统的影响

4.4.2 PNP40c-1 对 L-02 细胞凋亡的影响

4.4.3 PNP40c-1 对细胞炎症反应的影响

4.5本章小结

第5章 PNP40c-1对四氯化碳诱导肝损伤体内防护机制

5.1 引 言

5.2 PNP40c-1 对小鼠体重和脏器指数的影响

5.2.1 PNP40c-1 对小鼠体重的影响

5.2.2 PNP40c-1 对小鼠脏器指数的影响

5.3 PNP40c-1 对小鼠肝脏组织形态的影响

5.4 PNP40c-1 对肝损伤特异性血清标志物的影响

5.4.1 PNP40c-1 对血清转氨酶 ALT 和 AST 的影响

5.4.2 PNP40c-1 对血清 ALP 和 TBIL 的影响

5.5 PNP40c-1 对小鼠肝脏抗氧化系统的影响

5.5.1 PNP40c-1 对小鼠肝脏氧化应激的影响

5.5.2 PNP40c-1 对小鼠肝脏抗氧化能力的影响

5.5.3 PNP40c-1 对小鼠肝脏 NRF2 途径的影响

5.6 PNP40c-1 对小鼠肝脏细胞凋亡的影响

5.6.1 PNP40c-1 对小鼠原代肝细胞活力的影响

5.6.2 PNP40c-1 对小鼠肝细胞 CYP2E1 的影响

5.6.3 PNP40c-1 对小鼠肝细胞凋亡蛋白的影响

5.7 PNP40c-1 对小鼠肝脏炎症反应的影响

5.7.1 PNP40c-1 对 iNOS 酶活力的影响

5.7.2 PNP40c-1 对分泌炎症因子的影响

5.7.3 PNP40c-1 对炎症因子 mRNA 表达的影响

5.7.4 PNP40c-1 对 NF-κB 信号通路的影响

5.8 PNP40c-1 防护四氯化碳诱导小鼠肝损伤的作用机制

5.9本章小结

结 论

创新点

展 望

参考文献

附录

攻读博士学位期间发表的论文及其它成果

声明

致谢

个人简历