泰山松花粉多糖对化学性肝损伤的保护机制研究

摘要

肝脏作为体内最大且功能最多的消化器官，对机体代谢产生的有害物质和从各种途径进入机体的外源物质进行转化和储留，这使肝脏容易受到这些毒害物质的侵袭，引起各种急慢性肝损伤，甚至引起肝细胞坏死或凋亡。目前市场上已经有许多保肝药物，但其毒、副作用较大，并且价格昂贵，使其在临床应用上受到限制。因此，开发具有良好保肝效果且毒副作用小的天然药物是目前亟待解决的问题。松花粉是我国传统药食兼用的花粉品种，因其含有丰富的多种营养成分，使其具有多种生物学功效，其中就包括护肝功能。松花粉多糖作为松花粉中的一种生物活性大分子，已经被证实具有多种生物学功能，如抗氧化和免疫调节等。但松花粉多糖对肝损伤是否具有保护作用却鲜有报道。因此，本研究通过利用大鼠的急性CCl4肝损伤和小鼠的慢性酒精性肝损伤两种化学性肝损伤模型，分别从整体和分子水平上研究了泰山松花粉多糖（TPPPS）对化学性肝损伤的保护作用及其部分作用机制。主要研究结果如下：
　　1.本研究利用水提醇沉法结合脱色、脱蛋白处理获得了纯度较高的TPPPS，其多糖含量为73.46％；红外光谱分析显示TPPPS含有多糖类物质的特征性吸收峰；体外试验表明TPPPS对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)·、O2-自由基及H2O2具有较强的清除能力，对铁离子具有一定的还原能力，提示TPPPS具有较好的体外抗氧化活性，并与多糖浓度呈正相关关系。
　　2.通过建立大鼠急性CCl4肝损伤模型，研究了不同剂量TPPPS对CCl4肝损伤的保护效果。结果表明，TPPPS灌胃给药能明显降低CCl4诱导的肝损伤引起的血清中升高的ALT、AST、ALP水平和肝匀浆中升高的MDA的含量，并提高血清和肝匀浆中SOD、GSH-Px的活性，肝脏病理切片光镜观察结果也表明TPPPS减轻了CCl4引发的肝细胞的病理变化，提示TPPPS对CCl4诱导的化学性肝损伤具有一定的保护作用。
　　3.通过建立小鼠慢性酒精性肝损伤模型，研究了不同剂量TPPPS对慢性酒精性肝损伤的保护效果。结果表明，TPPPS灌胃给药能明显降低酒精诱导的肝损伤引起的血清中升高的ALT、AST、ALP水平，并显著降低肝匀浆中内质网应激相关蛋白GRP78和CHOP的表达量，肝脏病理切片电镜观察结果也表明TPPPS削弱了酒精引发的肝细胞中内质网的病理变化，提示TPPPS对酒精诱导的化学性肝损伤具有一定的保护作用。
　　综上所述，TPPPS对急性CCl4肝损伤和慢性酒精肝损伤具有明显的保护作用，其机理与其增强机体抗氧化能力，清除自由基和抑制内质网应激有关。

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1.前言

1.1多糖的研究进展

1.2松花粉多糖生物活性的研究进展

1.3肝损伤

1.4 本研究目的与意义

2.实验材料与方法

2.1 实验材料

2.2. 松花粉多糖的提取

2.3．松花粉多糖含量的测定

2.4．松花粉多糖的红外光谱分析

2.5 松花粉多糖体外抗氧化活性的测定

2.6松花粉多糖对CCl4诱导急性肝损伤大鼠的保护试验

2.7松花粉多糖对慢性酒精性肝损伤小鼠的保护试验

2.8 数据统计与分析

3．结果与分析

3.1 泰山松花粉多糖含量的测定

3.2 泰山松花粉多糖的红外光谱分析

3.3 泰山松花粉多糖体外抗氧化能力

3.3 泰山松花粉多糖对CCl4急性肝损伤大鼠相关指标的检测

3.4 泰山松花粉多糖对慢性酒精性肝损伤小鼠相关指标的检测

4．讨论

5．结论

参考文献

致谢