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摘要
第一章 绪论
1．1真菌耐药现象
1．2真菌耐药机制研究现状
1．2．1药物转运能力的改变
1．2．2药物靶标的改变
1．2．3代偿和代谢途径的利用
1．2．4生物膜的形成
1．3氨基糖苷类药物抗性机制研究现状
1．3．1胞内药物浓度的降低
1．3．2药物靶标的修饰
1．3．3药物钝化酶的修饰
1．3．4潮霉素B抗性机制研究现状
1．4盐对真菌生理状态影响研究现状
1．4．1盐离子转运机制及稳态调节
1．4．2盐对真菌生长代谢的影响
1．4．3盐对药物作用的影响
1．5木霉研究现状
1．5．1木霉的组学研究现状
1．5．2盐胁迫与木霉的研究现状
1．6论文的研究意义与目的
1．7论文的研究内容与方案
第二章海盐对哈茨木霉耐药性的影响及作用因素探究
2．1引言
2．2实验材料和仪器
2．2．1实验材料
2．2．2实验仪器
2．3实验方法
2．3．1培养基的配制
2．3．2不同浓度抗真菌药物培养基的配制
2．3．3接菌方法
2．3．4代谢产物的萃取及处理方法
2．3．5代谢产物的液质检测方法
2．3．6核磁检测方法
2．3．7菌丝形态的观察
2．4实验结果和讨论
2．4．1海盐对不同真菌的潮霉素B耐受性影响
2．4．2海盐对哈茨木霉的不同药物耐受性影响
2．4．3渗透压对哈茨木霉的潮霉素B耐受性影响
2．4．4不同离子对哈茨木霉等真菌的潮霉素B耐受性影响
2．4．5离子螯合对哈茨木霉的潮霉素B耐受性影响
2．4．6不同培养条件下菌丝形态及细胞壁的变化
2．4．7不同培养条件下代谢产物的变化
2．5本章小结
第三章海盐对哈茨木霉及其潮霉素B耐受性影响的转录组学分析与分子机制探究
3．1引言
3．2实验材料和仪器
3．2．1实验材料
3．2．2实验装置
3．3实验方法
3．3．1样品的准备
3．3．2表达量的计算及表达差异分析
3．3．3差异基因功能注释
3．4实验结果和讨论
3．4．1差异表达基因数量分析
3．4．2差异表达基因GO功能分类及富集
3．4．3差异表达基因KOG功能注释及富集
3．4．4差异表达基因KEGG注释
3．4．5各种相关基因筛选
3．4．6哈茨木霉对潮霉素B耐药分子机制分析
3．5本章小结
第四章耐药相关基因敲除突变株的构建及其潮霉素耐受性研究
4．1引言
4．2实验材料和仪器
4．2．1实验材料
4．2．2实验仪器
4．3实验方法
4．3．1同源臂片段的构建
4．3．2敲除质粒的构建
4．3．3原生质体制备与转化
4．3．4基因组DNA提取
4．3．5转化子的验证
4．3．6抗性实验方法
4．4实验结果和讨论
4．4．1目标敲除基因
4．4．2敲除同源臂片段的构建
4．4．3敲除转化子的筛选验证
4．4．4△512552突变株耐药性研究
4．4．5△504126突变株耐药性研究
4．4．6△506686突变株耐药性研究
4．5本章小结
第五章结论与展望
5．1结论
5．2创新点
5．3展望
参考文献
附录
致谢
研究结果及发表的学术论文
作者及导师简介
北京化工大学;
