比较两种重组Anti-CD20质粒转染活化T细胞对CD20阳性淋巴瘤细胞的杀伤作用

摘要

目的： 用课题组已经构建的Anti-CD20/Scfv/CD80/CD28/IgGFc/ζ和anti-CD20scFv/IgGFc/ζ重组质粒分别转染外周血T淋巴细胞，比较2种嵌合锚定的T淋巴细胞与CD20阳性的淋巴瘤细胞株接触后的活化杀伤作用。 方法： 1.取得已经转染成功的重组质粒，并加以扩增； 2.-2种重组质粒分别用Lipofecting2000转染PA317细胞株，并用G418筛选，以获得可以产生携带大量目的基因的逆转录病毒，并以NIH3T3细胞株测量病毒的滴度； 3.从人体外周血中分离大量T淋巴细胞，以逆转录病毒感染T细胞后用G418筛选获得稳定转染成功的T细胞； 4.用稳定转染成功的嵌合锚定T淋巴细胞活化杀伤CD20阳性的淋巴瘤细胞株，检测其培养液中的IL-2、IFN-γ(ELISA法)。 结果： 1.扩增成功的重组质粒经电泳后证实与原质粒一致。 2.经过转染后有PA317细胞株存活，并成功测得其产生的病毒滴度。 3.成功分离大量T淋巴细胞，并成功获得稳定转染。 4.两种嵌合锚定的T淋巴细胞活化杀CD20阳性的淋巴瘤细胞株，用ELISA法测得杀伤后的CD20阳性淋巴瘤细胞株培养液中的IL-2、IFN-γ含量，并评估2者的杀伤效能。

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前言

1材料与方法

结果

小结

分析与讨论

参考文献

附图

致谢

抗CD20单克隆抗体在临床治疗中的进展