SCH58261对胎兔缺氧缺血性脑损伤的神经保护作用研究

摘要

目的：
　　 建立胎兔缺氧缺血性脑损伤模型，探讨选择性腺苷A2A受体拮抗剂SCH58261是否对胎兔缺氧缺血性脑损伤有神经保护作用，并明确其对胎兔缺氧缺血性脑损伤神经保护作用的最佳药物剂量。
　　 方法：
　　 在新西兰孕兔孕29天时从左侧股动脉插入4F Fogarty动脉取栓导管约10cm，至降主动脉与子宫动脉分支处，向导管球囊内注入0.3ml生理盐水扩张球囊，阻断子宫血流25分钟，造成胎兔缺氧缺血性脑损伤模型。将41只新西兰孕兔随机分成6组，分别为假手术组，缺氧缺血组，DMSO组（溶剂对照组），选择性腺苷A2A受体拮抗剂SCH582610.004mg/kg组，SCH582610.04mg/kg组，SCH582610.12mg/kg组。后四组在造模结束后即刻通过孕兔耳缘静脉分别注射DMS02ml，选择性腺苷A2A受体拮抗剂SCH582610.004mg/kg，0.04mg/kg，0.12mg/kg（以上三组SCH58261均溶于2ml DMSO液中）。24小时后剖宫产取出新生兔，进行神经行为学评分，脑含水量测定，HE染色观察组织病理学改变，TUNEL&DAPI双染法观察细胞凋亡情况。
　　 结果：
　　 1.一般情况比较:孕兔体重、单窝产崽数及新生兔的出生体重比较无统计学差异。缺氧缺血组及DMSO组较假手术组新生兔死胎率明显升高，选择性腺苷A2A受体拮抗剂SCH58261不同剂量给药组死胎率（0.004mg/kg组，0.04mg/kg组，0.12组的死胎率分别为13.33％，4.76％，2.22％）较缺氧缺血组(17.39％)有明显下降，具有统计学差异（P＜0.01）。
　　 2.神经行为学评分:缺氧缺血组较假手术组姿势、翻正反射、吞咽反射得分均明显下降，差异有统计学意义（P＜0.01），姿势、翻正反射得分SCH58261不同剂量给药组得分均高于缺氧缺血组（P＜0.01），吞咽反射得分SCH582610.04mg/kg组与0.12mg/kg组得分均高于缺氧缺血组（P＜0.01），姿势及翻正反射得分与剂量成正相关（分别为r1=0.638，P1＜0.01; r2=0.637，P2＜0.01）。
　　 3.脑含水量:胎兔缺氧缺血组脑含水量(89.71±0.17)％高于假手术组(88.24±0.24)％，差异具有统计学意义（P＜0.01），缺氧缺血组与DMSO组(89.63±0.23)％比较无统计学差异（P=0.516），SCH582610.004mg/kg组(89.25±0.35)％低于缺氧缺血组（P＜0.01），0.04mg/kg组(88.58±0.21)％低于0.004mg/kg组(P＜0.01)，0.12mg/kg组(88.32±0.16)％略低于0.04mg/kg组（P＜0.05），与剂量成负相关(r=-0.775，P＜0.01)。
　　 4.HE染色示缺氧缺血组脑组织结构紊乱，细胞数明显减少，细胞核深染、固缩，边界欠清，与周围细胞联系欠紧密;假手术组未见明显病理改变。DMSO组病理改变与缺氧缺血组类似，SCH582610.004mg/kg组脑组织损伤程度较缺氧缺血组改善，细胞数明显多于缺氧缺血组，但较假手术组而言，其细胞边界模糊，排列紊乱;0.04mg/kg组细胞间联系不紧密，边界欠清，染色深浅不一，肉眼观察与0.004mg/kg组相异不大;0.12mg/kg组细胞数稍少于假手术组，部分见核固缩，细胞间联系不紧密，较0.004mg/kg组及0.04mg/kg组明显改善。DAPI&TUNEL双染示假手术组未见明显凋亡细胞，缺氧缺血组凋亡细胞多，多见于皮质颗粒层，SCH582610.12mg/kg组皮质区仅见部分凋亡细胞。
　　 结论：
　　 1.选择性腺苷A2A受体拮抗剂SCH58261可以减轻胎兔缺氧缺血性脑损伤程度和神经功能缺陷。
　　 2.在胎兔宫内窒息导致缺氧缺血性脑损伤后，即刻通过孕兔耳缘静脉给予选择性腺苷A2A受体拮抗剂SCH58261有神经保护作用，高剂量组(0.12mg/kg)其神经保护作用最明显。

目录

英文缩略词表

摘要

引言

材料与方法

一、材料

二、方法

结果

1．一般情况

2．神经行为学评分

3．脑含水量

4．H-E染色结果

5．细胞凋亡情况

分析与讨论

一、胎兔缺氧缺血性脑损伤模型的评价

二、选择性腺苷A2A受体拮抗剂SCH58261对胎兔缺氧缺血性脑损伤的神经保护作用及有效剂量

三、选择性腺苷A2A受体拮抗剂SCH58261对缺氧缺血性脑损伤神经保护作用

结论

参考文献

附录

致谢

腺苷A2A受体在缺血性脑损伤中的作用

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