声明
缩略词表
一、文献综述
1 染色体工程及其研究进展
1.1染色体内大片段的缺失和重排
1.2染色体显微操作技术
1.3 微细胞介导的染色体转移
1.4人工染色体
2 基因编辑技术及其研究进展
2.1 ZFN技术
2.2 TALEN技术
2.3CRISPR技术
3同源重组技术
4 HPRT基因及其研究进展
5本实验研究目的及意义
二、CRISPR/Cas9介导的牛胎儿成纤维细胞中Puro-TK在X染色体HPRT基因上的定点敲入
1材料与仪器
1.1 实验动物
1.2 菌株、载体
1.3主要试剂及其配制
1.4仪器与设备
2 实验方法
2.1 牛胎儿成纤维细胞的制备及鉴定
2.2 构建Cas9-gRNA载体及最佳Cas9载体的确定
2.3 打靶载体的构建、鉴定及目的细胞的筛选
3 实验结果
3.1 牛胎儿成纤维细胞的制备及鉴定
3.2 构建Cas9-gRNA载体及最佳Cas9载体的确定
3.3 打靶载体的构建、鉴定及目的细胞的筛选
4 讨论
5 结 论
参考文献
致谢
