弹性硅胶表面附载温度敏感性涂层用于细胞片层的制备研究

摘要

目的：本研究以力学性能优良的硅胶聚二甲基硅氧烷（PDMS）为基底材料，在其表面接枝聚合温度敏感型 PNIPAAm薄膜，并用来培养小鼠成骨细胞（MC3T3）片。在实验中探究材料表面上细胞的贴壁、生长、增殖及细胞片的脱附。本研究拟为骨组织工程提供一种无损伤的操作方便的细胞片构建方法，并期望在后期实验中能利用基底材料（PDMS）优异的力学特征，对细胞培养的同时进行体外力学动态测试，同时收获性能更优的细胞片。
　　实验过程及结果：本实验通过特制的拉伸皿模具，制作 PDMS力学拉伸皿，将NIPAAm单体通过紫外光接枝聚合到等离子处理过的 PDMS拉伸皿表面，并对拉伸皿底表面进行电子扫描显微镜（SEM）观察，能谱分析和傅里叶红外光谱分析，实验结果证明了接枝层的存在。然后在表面接枝成功的培养皿内加入纤连蛋白溶液对培养基材进行表面蛋白修饰，再将 MC3T3细胞接种在实验组的 PDMS拉伸皿上。PNIPAAm-g-PDMS组细胞在培养至第五天，细胞相互紧挨堆叠，单个细胞形态模糊，出现肉眼可见的细胞膜片。在温度降到4℃后，细胞膜边缘开始翘起并逐渐往中间延伸，第30min后，细胞片完全脱附。脱附的细胞片在活/死染色后，细胞片被染成绿色，轮廓清晰。至此证明细胞片成功构建及脱附。
　　实验结论：实验利用等离子体和紫外光照接枝技术在弹性硅胶表面附载了温度敏感型PNIPAAm薄膜，成功培育了小鼠成骨细胞（MC3T3）片，并利用温控技术成功脱附。实验证实了这种制备新型智能化材料并同时构建细胞片层方法的可行性，从而为细胞片的无损制备和细胞力学的实验方法提供了新的思路。

目录

声明

引言

1.材料与方法

1.1 试剂与仪器

1.2 实验方法

1.3 实验流程

2.结 果

2.1 PDMS拉伸皿底表面接枝层的FTIR分析

2.2 PDMS拉伸皿底表面形貌和能谱分析

2.3 细胞培养

2.4 细胞片的构建及脱附

2.5 细胞片的活/死检测

3.讨 论

3.1 实验材料的选择分析

3.2 PDMS拉伸皿表面接枝PNIPAAm

3.3 细胞粘附及生长

3.4 细胞脱附

3.5 实验的改进及展望

4.结 论

参考文献

综述

英文缩略词表

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致谢