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细菌S76拮抗禾谷镰刀菌机理及小麦储藏中菌群和毒素变异研究

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摘要

缩略语表

1.前言

1.1镰刀菌毒素及其危害

1.2镰刀菌组学研究进展

1.2.1镰刀菌基因组学水平研究

1.2.2镰刀菌转录组学水平研究

1.3生物防治在植物病害应用

1.3.1生物防治策略与其他防治策略比较

1.3.2生物防治主要作用方式

1.3.3赤霉病生物防治发展状况

1.4脂肽研究进展

1.4.1脂肽类物质结构及分类

1.4.2脂肽合成基因簇

1.4.3脂肽作用于病原菌的机制研究

1.5小麦储藏研究

1.5.1小麦储藏现状

1.5.2储藏环境对谷物储藏的影响

1.5.3小麦储藏菌群发生研究

1.6本研究的目的与意义

2材料与方法

2.1实验材料

2.1.1实验菌株及植物材料

2.1.2基因操作载体质粒

2.1.3实验试剂与试剂盒

2.1.4实验仪器设备

2.1.5抗生素的配制

2.1.6实验培养基和缓冲液配方

2.1.7实验PCR引物

2.2试验方法

2.2.1大肠杆菌热激及电击转化感受态细胞制备

2.2.2大肠杆菌热激转化

2.2.3试剂盒提取质粒

2.2.4煮沸法抽提质粒

2.2.5禾谷镰刀菌基因组DNA提取

2.2.6禾谷镰刀菌和小麦RNA提取及cDNA的合成

2.2.7禾谷镰刀菌基因敲除

2.2.8禾谷镰刀菌突变子鉴定

2.2.9 PCR体系

2.2.10脂肽物质与禾谷镰刀菌互作分析

2.2.11脂肽物质与小麦互作分析

2.2.12禾谷镰刀菌功能基因分析

2.2.13小麦储藏期菌群发生机制研究

3结果与分析

3.1.2禾谷镰刀菌应答拮抗菌S76及脂肽的表达谱分析

3.1.3拮抗菌S76及脂肽作用于禾谷镰刀菌的靶位点鉴定与分析

3.1.4脂肽诱导禾谷镰刀菌的细胞壁重塑

3.1.5脂肽诱导禾谷镰刀菌的细胞渗透物甘油的合成

3.1.6脂肽影响禾谷镰刀菌CWI和HOG信号路径蛋白磷酸化

3.1.7小结

3.2小麦与拮抗菌S76及其脂肽的互作

3.2.1小麦应答拮抗菌S76及其脂肽的转录组分析

3.2.2拮抗菌S76及其脂肽对小麦生长萌发影响

3.2.3小结

3.3小麦、禾谷镰刀菌与拮抗菌S76菌株及其脂肽的互作

3.3.1拮抗菌S76调控禾谷镰刀菌基因在侵染小麦过程中的表达

3.3.2脂肽诱导小麦对赤霉病的抗性

3.3.3脂肽对小麦穗上DON毒索积累影响

3.3.4受S76菌株调控的镰刀菌水解酶基因编码蛋白及其结构域分析

3.3.5受S76调控的禾谷镰刀菌水解酶功能鉴定

3.3.6小结

3.4在自然储藏过程中小麦储藏菌群和毒素变化分析

3.4.1小麦自然储藏过程中菌群ITS和V3V4测序数据统计分析

3.4.2小麦自然储藏过程中菌群变化分析

3.4.3小麦储藏自然过程中毒素变化规律分析

3.4.4小麦自然储藏过程中菌群相互关系分析

3.4.5小结

4讨论

4.1.1拮抗菌S76及其脂肽与禾谷镰刀菌互作

4.1.2拮抗菌S76及其脂肽与小麦互作

4.1.3小麦、禾谷镰刀菌与拮抗菌S76菌株及其脂肽的互作

4.2小麦储藏中菌群和毒素变异研究

4.2.1小麦自然储藏过程中菌群变化分析

4.2.2小麦自然储藏过程中毒素变化规律分析

4.3展望

参考文献

附录

致谢

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