PPARα/PGC1-α/AKT信号通路在低剂量TFA对大鼠心肌组织损伤中的作用

摘要

目的：反式脂肪酸（TFA）是含有反式构型双键的不饱和脂肪酸的总称，主要来源包括反刍动物体内合成、植物油精炼和油脂氢化过程。氢化油脂具有熔点高、氧化稳定性好、货架期长、口感宜人等特点，被广泛用于食品加工中，我国居民TFA的摄入量也呈现逐年上升趋势。20世纪70年代的研究发现，心血管疾病与食用氢化脂肪有关。之后大量研究证实了TFA可导致血栓形成、炎症反应、动脉硬化，大脑功能衰退、致癌性，诱发Ⅱ型糖尿病、冠心病等。目前国内外关于反式脂肪酸诱发心血管疾病的研究虽然较多，但其分子机制尚不清楚。尤为重要的是，已报导的研究中多是高浓度TFA对机体健康的影响，关于低剂量TFA的研究甚少，因此，为了进一步探讨低浓度TFA对心血管系统影响的分子机制，我们进行了如下研究。
　　方法：健康清洁级SD大鼠48只，雌雄各半，体重180g左右，适应性喂养一周，测基础血压，遵从随机、均衡原则，采用查阅随机数字表法将其分为对照组（ND）、1％TFA组（LTD）、4%TFA组（HTD）共3组，每组16只，雌雄分笼，饲养12周。实验期间每周记录动物的进食及体重变化，在0、6和12周时分别测量大鼠的血压值。喂养12周后，禁食12h，不禁水，称重，断头处死，收集的血液放入非抗凝管中，室温静置20min，4000r/min离心15min分离血清，-80℃保存。全自动生化分析仪检测各组大鼠血清血脂指标。分离出大鼠的心脏组织，其中每组6只用于做病理学切片，观察心脏形态学变化，余下心脏组织做如下检测：按试剂盒操作说明书测定大鼠心脏组织SOD的活力及MDA的含量；Western blot法测定大鼠心脏组织PGC1-α、PPARα、AKT、p-AKT、Bcl-2、Bax蛋白的表达量。数据以X±SD表示，多组间比较采用SPSS21软件对数据进行 One-way ANOVA检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
　　结果：
　　1.TFA对大鼠体重、进食量、血压的影响
　　12周雌雄各组大鼠体重均无差异（P>0.05）；雌雄各组进食量及每周体重随年龄增加均有所增加，但各组间无差异（P>0.05）；0、6、12周时各组大鼠血压亦无统计学差异（P>0.05）。
　　2.TFA对大鼠血脂的影响
　　LTD和HTD组大鼠TG水平明显高于ND组（P＜0.05）；HTD组大鼠LDL水平明显高于ND组（P＜0.05）。其他各组之间比较均无统计学差异（P＞0.05）。
　　3.TFA对大鼠心肌组织PPARα/PGC1-α/AKT/p-AKT的影响
　　Western blot结果显示，与ND组相比，LTD和HTD组大鼠心脏组织中PPARα、PGC1-α蛋白表达均明显降低（P＜0.05)，p-AKT/AKT的比值明显下降（P>0.05）。
　　4.TFA对大鼠心脏组织氧化应激的影响
　　与ND组相比，LTD和HTD组大鼠心脏组织MDA含量明显增加， SOD活性显著降低（P＜0.05），表明反式脂肪酸可诱导大鼠心肌组织氧化应激。
　　5.大鼠心脏病理学改变
　　HE染色结果显示，ND组大鼠心脏组织心肌细胞形态正常，排列整齐。LTD和HTD组均可见炎细胞浸润，但两组间没有明显区别。
　　6.TFA对大鼠心肌组织凋亡的影响
　　与ND组相比，LTD和HTD组大鼠心脏组织中Bcl-2蛋白的表达明显降低（P＜0.05）, Bax蛋白的表达差异无统计学意义（P＞0.05），Bcl-2/Bax比值明显降低（P＜0.05），说明反式脂肪酸可诱导大鼠心肌组织细胞凋亡。
　　结论：低剂量反式脂肪酸可通过PPARα/PGC1-α/AKT信号通路引起氧化应激，从而诱发大鼠心肌组织细胞凋亡及炎性细胞浸润。

目录

声明

英文缩写

前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 检测方法

结果

3 TFA对大鼠心肌组织PPARα/PGC1-α/AKT/p-AKT的影响

4 TFA对大鼠心脏组织氧化应激状态的影响

5 心脏病理学改变

6 TFA对大鼠心肌组织凋亡的影响

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述:反式脂肪酸的性质及危害

致谢

个人简历