慢病毒shRNA靶向敲低线粒体内膜蛋白(Mic19、Mic60)表达对肝癌细胞相关生物学作用的影响

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英文缩略词表(Abbreviation)

1 引言

2 材料与方法

2.1质粒、细菌和细胞

2.2 主要试剂和仪器

2.3 实验方法

2.3.1细胞培养

2.3.2 制备大肠杆菌感受态细胞

2.3.3 质粒转化

2.3.4质粒的小抽提取

2.3.5碱裂解法提取质粒

2.3.6 细胞转染

2.3.7 构建及包装慢病毒载体

2.3.8 敲低Mic19及Mic60表达稳定细胞株筛选

2.3.9 蛋白印迹法检测蛋白表达

2.3.10 MTT法检测细胞存活率

2.3.11 Wound healing实验检测细胞迁移

2.3.12 Transwell实验检测细胞迁移及侵袭

2.3.13 统计学方法

3 结果

3.1 慢病毒shRNA靶向敲低Mic19及Mic60表达的稳定细胞株筛选

3.2 敲低Mic19及Mic60表达抑制肝癌细胞的增殖

3.3 敲低Mic19及Mic60表达促进肝癌细胞的凋亡

3.4 敲低Mic19及Mic60表达抑制肝癌细胞的迁移

3.5 敲低Mic19及Mic60表达抑制肝癌细胞的迁移和侵袭

4 讨论

5结论

参考文献

附录

致谢

综述:线粒体内膜蛋白Mic19/CHCHD3的研究与进展