四种食源性致病菌液相芯片xTAG技术检测方法的建立

目录

1 前 言

1.1 选题来源

1.2 研究背景

1.3 四种食源性致病菌概况

1.3.1 鼠伤寒沙门氏菌（S. Typhimurium）

1.3.2 布鲁氏菌（Brucella spp.）

1.3.3蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）

1.3.4 志贺氏菌（Shigella spp.）

1.4 食源性致病菌检测方法及研究现状

1.4.1 免疫学检测技术

1.4.2代谢学检测技术

1.4.3生物传感器检测技术

1.4.4分子生物学检测技术

1.4.5基因芯片技术

1.5 液相芯片技术的发展与应用

1.5.1液相芯片的工作原理

1.5.2 液相芯片技术的性能与应用

1.5.3 xMAP与xTAG技术

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 主要试剂

2.3 主要仪器与设备

2.4检测方法的建立

2.4.1 菌株的培养

2.4.3 细菌基因组DNA的提取

2.4.4 引物与探针

2.4.5 多重PCR反应条件及优化

2.4.5 杂交试剂的准备

2.4.6 Luminex200液相芯片平台操作及结果分析

2.4.7 xTAG实验条件优化

2.5方法学评价及模拟样本检测

2.5.1 特异性实验

2.5.2 灵敏度实验

2.5.3 稳定性实验

2.5.4 模拟实际样本检测

3 结果与分析

3.1 PCR条件优化结果及分析

3.2杂交孵育条件正交试验优化结果及分析

3.3 方法学评价试验结果

3.3.1 检测方法特异性试验

3.3.2 检测方法灵敏性试验

3.3.4 检测方法稳定性试验

3.4 模拟样本检测试验结果及分析

4讨论

5结论

参考文献

作者简介

致谢