不同益生菌对高脂血症仓鼠降血脂作用的研究

摘要

本文从降血脂、抗动脉粥样硬化等多方面研究了不同益生菌菌株对高脂血症仓鼠调节血脂的作用及其机理。
　　本文利用高脂饲料建立仓鼠高脂血症模型，四种不同的益生菌菌液给仓鼠灌胃，连续灌胃六周。每两周空腹测定血清TC、TG、HDL-C的含量。结果表明四种益生菌均可有效降低高脂膳食仓鼠血清TC、TG、non-HDL-C含量及AI值，提高HDL-C含量。鼠李糖乳杆菌降低血清TG含量的作用最强，血清中TG含量为184.98±8.83mg/dl;嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌降低血清TC含量的作用较强，分别为213.00±6.25mg/dl和211.04±6.07mg/dl。测定肝脏组织及粪便中TC、TG的含量，结果表明嗜酸乳杆菌降低肝脏中TC含量、提高粪便中TC含量的作用最强，分别为45.28±1.66mg/g和8.08±0.66mg/g。利用气相色谱检测粪便中短链脂肪酸的含量，结果表明四种益生菌均能够显著提高粪便中乙酸、丙酸的含量，嗜酸乳杆菌、双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌均能极显著提高粪便中丁酸的含量。提示四种益生菌均能有效调节高脂血症仓鼠脂质代谢，减少脂质在体内的积累，其机理可通过增加肠道短链脂肪酸的含量从而抑制胆固醇的合成，同时增加胆固醇的排泄，降低胆固醇的含量。通过测定仓鼠脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量评价益生菌对体内脂质过氧化的作用。结果表明四种益生菌均能抑制肝脏中MDA的生成，降低体内脂质过氧化水平，起到拮抗动脉粥样硬化的作用。
　　利用荧光实时定量PCR法检测仓鼠肝组织HMG-CoA-R、LDL-RmRNA的表达水平，结果表现为嗜酸乳杆菌与鼠李糖乳杆菌均能够升高高脂血症仓鼠肝组织HMG-CoA-R、LDL-RmRNA的表达，发挥降低胆固醇的功效。
　　本文首次系统的比较研究了四种不同的益生菌对仓鼠脂质代谢的调节作用，并对益生菌调节脂质代谢的机理进行了探讨，为益生菌的生理功效和益生作用的深度开发提供了一定的理论依据。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 益生菌的研究概况

1．1．1 益生菌的概念

1．1．2 益生菌的种类

1．1．3 益生菌应用的国际规范

1．1．4 益生菌的生理功能

1．1．5 益生菌降血脂作用的研究现状

1．1．6 益生菌在食品中的应用

1．2 高脂血症

1．2．1 高脂血症的诊断标准

1．2．2 高脂血症的危害

1．2．3 高脂血症的治疗现状

1．3 高脂血症动物模型的选择

1．4 本课题的研究内容和意义

1．4．1 研究的主要内容

1．4．2 研究的意义

2 材料与方法

2．1 实验动物及饲养条件实验材料

2．2 实验材料与设备

2．2．1 原料及试剂

2．2．2 仪器与设备

2．2．3 主要培养基

2．2．4 实验试剂

2．2．5 实验仪器与设备

2．3 实验方法

2．3．1 四种益生菌灌胃菌液的制备

2．3．2 实验动物的处理与检测方法

2．3．3 肝脏病理学观察

2．3．4 仓鼠肝组织mRNA表达水平的测定

2．4 统计学方法

3 结果与讨论

3．1 益生菌对高脂血症仓鼠的影响

3．1．1 益生菌对仓鼠体重、摄食量及饲料利用率的影响

3．1．2 益生菌对仓鼠血清血脂水平的影响

3．1．3 益生菌对动脉硬化指数(AI)及TG／HDL-C的影响

3．1．4 益生菌对仓鼠脏器指数的影响

3．1．5 益生菌对附睾周脂重和肾周脂重等指标的影响

3．1．6 益生菌对肝脏组织TC和TG含量的影响

3．1．7 益生菌对粪便中TC和TG含量的影响

3．1．8 益生菌对粪便中微生物菌群的影响

3．1．9 益生菌对肠道中微生物菌群的影响

3．1．10 益生菌对粪便pH值的影响

3．1．11 益生菌对粪便中水分的影响

3．1．12 益生菌对粪便中短链脂肪酸的影响

3．1．13 肝脏病理学切片观察

3．1．14 益生菌对脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量的影响

3．2 仓鼠肝组织mRNA表达水平的测定

3．2．1 RNA纯度的鉴定

3．2．2 RNA完整性的鉴定

3．2．3 扩增产物的鉴定

3．2．4 荧光实时定量PCR结果

4 结论

5 展望

参考文献

7 攻读硕士学位期间发表论文情况

致谢