粳米脂肪氧化酶LOX-3氧化调控规律研究

摘要

稻谷储藏过程中理化性质产生系列变化导致品质下降，其中脂肪酸氧化是稻谷陈化的重要因素。脂肪酸氧化酶(LOX)催化水稻谷粒脂质的过氧化反应产生醛、酮等挥发性物质和氢过氧化物及其衍生物和自由基，这些物质对蛋白质、膜结构、细胞组织以及DNA造成破坏，缩短稻谷的安全储藏时间，加速稻谷陈化。脂肪酸氧化酶的三种同功酶（LOX-1、LOX-2、LOX-3）中LOX-3在成熟胚中大量表达，占未萌发水稻种子LOX总活性的80％-90％，是稻谷陈化过程的关键酶。
　　为进一步明确稻谷陈化机理，本论文进行了以下研究:
　　(1)以老化指数为表型的分类指标，从平均分布于水稻12条染色体上的264个分子标记筛选得到12对与稻谷老化相关的分子标记，并利用这12对标记对35份水稻品种进行基因型分析。根据基因型对水稻品种进行聚类分析，将水稻品种分为耐储藏A组和不耐储藏B组。储藏前后总酚差值变化A组明显优于B组，但是组内差值变化不显著。
　　(2)对A、B两个亚组代表品种进行lox-3基因及其调控序列的差异性分析;从而得到影响LOX-3表达的关键序列。耐储藏品种lox-3基因型特异性序列位点为TTAAATCAACTTTTCG。
　　(3)不耐储藏B组的代表品种W45、津原E5进行CA储藏，测定大米储藏期脂肪酸、总酸、脂肪酸氧化酶、LOX-3等大米脂肪酸氧化重要代谢成份并进行分析，确定低氧对不耐储藏B组粳型大米脂肪酸氧化有较好的抑制作用，且最佳储藏条件是温度0℃，O2浓度为1％。
　　(4)W45进行高温MA储藏，测定大米储藏期脂肪酸、总酸、脂肪酸氧化酶、LOX-3等大米脂肪酸氧化重要代谢成份并进行分析，确定0.12mm保鲜膜保鲜效果最佳。
　　本研究通过粳米基因型水稻品种的耐储藏条件优选建立大米保鲜体系，指导我国稻谷储藏技术，减少我国稻谷储藏损失，提高稻谷储藏期食用品质。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 大米保鲜技术研究

1．1．1 大米储藏条件对大米保鲜的影响

1．1．2 大米储藏过程中品质变化

1．1．3 大米陈化机理假说

1．2 大米气调储藏

1．2．1 国内大米气调技术研究

1．2．2 国外大米气调技术

1．2．3 气调储藏的机理研究现状

1．2．4 气调储藏的分类

1．3 脂肪酸氧化在大米陈化过程中的作用

1．3．1 大米陈化影响因素

1．3．2 脂肪酸氧化在大米陈化过程中的影响

1．4 大米基因型与耐储性的关系

1．5 研究目的与意义

1．6 研究内容

2 材料和方法

2．1 材料与仪器

2．1．1 实验材料

2．1．2 实验试剂

2．1．3 实验仪器

2．2 实验方法

2．2．1 水分的测定(GB 5009．3-85)

2．2．2 游离脂肪酸的测定

2．2．3 总酸的测定

2．2．4 脂肪酸氧化酶的测定

2．2．5 LOX-3的测定

2．2．6 基因组DNA的提取(CTAB法)

2．2．7 分子标记筛选

2．2．8 CA储藏大米

2．2．9 MA储藏大米

3 结果与讨论

3．1 大米陈化相关基因序列特异性

3．1．1 老化指数分析

3．1．2 聚类分析

3．1．3 聚类亚组大米储藏品质变化

3．1．4 大米陈化分子标记

3．2 CA储藏对粳型大米脂肪酸氧化的调控效应

3．2．1 CA储藏对粳型大米水分含量的调控效应

3．2．2 CA储藏对粳型大米脂肪酸含量的调控效应

3．2．3 CA储藏对粳型大米总酸含量的调控效应

3．2．4 CA储藏对粳型大米LOX酶活的调控效应

3．2．5 CA储藏对粳型大米LOX-3酶含量的调控效应

3．3 MA储藏对粳型大米脂肪酸氧化的调控效应

3．3．1 MA储藏对粳型大米水分含量的调控效应

3．3．2 MA储藏对粳型大米脂肪酸含量的调控效应

3．3．3 MA储藏对粳型大米总酸含量的调控效应

3．3．4 MA储藏对粳型大米LOX酶活的调控效应

3．3．5 MA储藏对粳型大米LOX-3酶活的调控效应

4 结论

5 展望

参考文献

7 攻读硕士学位期间发表论文情况

致谢