核桃内种皮废弃物的再生利用

摘要

中国核桃资源丰富，核桃加工产业发达，核桃内种皮中富含大量对人体有益的多酚类化合物，但在核桃乳加工过程中常作为废弃物丢弃。为实现资源的深度开发利用，本文以核桃内种皮废弃物为原料，从中提取多酚类化合物，研究最佳提取工艺，并对其体内外抗氧化活性进行评价，为开发抗氧化功能食品提供理论依据。主要研究内容如下:
　　通过酸醇提取法进行单因素及响应面(BBD)优化实验，以总酚含量和DPPH自由基清除活性为评价指标，确定核桃内种皮中多酚的最佳提取工艺:乙醇体积分数68％，提取温度79℃，料液比为1∶42，提取时间1h，pH为2。提取多酚含量为20.25mg GAE/g，DPPH自由基清除活性为30.76mg Vc/g，得率82.95％。浓缩干燥后得到多酚粗提物161.35mg/g，纯度为12.55％。
　　HPLC法测定核桃内种皮多酚粗提物中的酚酸单体成分（没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸和鞣花酸）。其中，含量最多的是鞣花酸3142.8mg/100g，其次是没食子酸和丁香酸，分别为456.15mg/100g、145.82mg/100g。含量最少的是绿原酸29.99mg/100g。
　　通过DPPH自由基清除活性、ABTS自由基清除活性、FRAP亚铁离子还原能力和铁氰化钾总还原能力测定对核桃内种皮多酚粗提物的体外抗氧化活性进行研究，以L-抗坏血酸为对照，得到的结果是核桃内种皮多酚粗提物具有与L-抗坏血酸相当的体外抗氧化活性，值得进一步研究。
　　选用D-半乳糖致衰小鼠模型，低、中、高剂量组分别灌胃200、400、800mg/kg·bw·d的核桃内种皮多酚提取物，模型组灌胃等量的双蒸水。七周后，对小鼠进行平衡木、紧绳和旷场等行为学实验，结果显示剂量组小鼠的学习认知能力、空间探索能力、记忆能力和体力明显强于D-半乳糖致衰老模型对照组小鼠。八周后，测定小鼠血清、肝脏和脑组织中过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)。结果表明，与模型对照组相比，核桃内种皮多酚提取物可显著提高小鼠血清、肝脏和脑组织中CAT、GSH-Px、SOD含量和T-AOC活力，并降低MDA含量。因此，核桃内种皮多酚提取物可减轻D-半乳糖导致的氧化损伤，具有一定的抗氧化能力，此抗氧化能力与提取物中富含多酚成分有关。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 核桃

1．1．1 概述及资源分布

1．1．2 核桃的营养价值

1．1．3 核桃乳产业的废弃物——核桃内种皮

1．2 多酚的研究进展

1．2．1多酚的概述

1．2．2 核桃多酚的研究现状

1．2．3 多酚的生物活性

1．2．4 多酚的应用

1．3 多酚的提取方法

1．3．1 溶剂提取

1．3．2 超声波辅助提取法

1．3．3 微波辅助提取法(MAE)

1．3．4 超临界流体萃取法

1．3．5 生物酶辅助提取法

1．4 抗氧化测定方法

1．4．1 体外抗氧化活性评价方法

1．4．2 体内抗氧化活性评价方法

1．5 高效液相色谱法分离检测多酚

1．6 本课题的研究目的和意义

1．6．1 研究意义

1．6．2 研究内容

2 材料与方法

2．1 实验材料与设备

2．1．1 实验原料与动物

2．1．2 主要试剂

2．1．3 主要仪器

2．2 试验方法

2．2．1 核桃内种皮多酚提取工艺优化

2．2．2 高效液相色谱法(HPLC)测定核桃内种皮多酚提取物活性单体成分

2．2．3 核桃内种皮多酚提取物体外抗氧化活性研究

2．2．4 核桃内种皮多酚提取物对D-半乳糖致衰小鼠体内抗氧化能力研究

2．3 数据处理和统计分析

3 结果与讨论

3．1 提取方法筛选结果

3．2．1 单因素试验

3．2．2 响应面优化实验

3．3 HPLC法检测核桃内种皮多酚粗提物中的酚类化合物

3．4 内种皮多酚提取物体外抗氧化活性研究

3．4．1 DPPH自由基清除活性研究

3．4．2 ABTS自由基清除活性研究

3．4．3 FRAP亚铁离子还原能力研究

3．4．4 总还原能力研究

3．5 内种皮多酚提取物体内抗氧化活性研究

3．5．2 内种皮多酚提取物对D-半乳糖致衰小鼠主要脏器的影响

3．5．3 行为学实验

3．5．4 抗氧化指标测定

3．5．5 肝脏切片病理学观察

4 结论

5 展望

参考文献

7论文发表情况

致谢