miR-122对乙型肝炎病毒抗原表达的影响

摘要

目的:探讨miR-122对乙型肝炎病毒HBsAg、HBeAg表达的影响。方法:以空白对照组(阴性对照组),GFP(反义寡核苷酸序列)组为阴性对照,设计合成2条miR-122的反义寡核苷酸序列anti-miR-122,LNA-antimiR-122(反义锁核苷酸)以及人miR-122的寡核苷酸序列(hsa-miR-122)。脂质体包裹后分别以400nm/L(GFP组),400nm/L(anti-miR-122组),40nm/L(LNA-antimiR-122组),400nm/L(hsa-miR-122)转染HepG2.2.15细胞。细胞转染24小时,48小时后取培养液上清,时间分辨荧光免疫法检测HBsAg,HBeAg的表达。转染48小时后,提取总RNA,Taqman技术实时荧光定量PCR检测anti-miR-122组,LNA-antimiR-122组,hsa-miR-122组,GFP组,和阴性对照组内细胞miR-122的含量。结果:①转染24小时后HBsAg表达:hsa-miR-122组HBsAg表达低于阴性对照组(p<0.05),has-miR122组HBsAg表达低于anti-miR-122组(p<0.01),anti-miR122组HBsAg表达高于GFP组(p<0.01)。②转染24小时后HBeAg表达:anti-miR122组HBeAg表达高于阴性对照组(p<0.01),LNA-antimiR-122组HBeAg表达显著高于阴性对照组(p<0.01),hsa-miR-122组HBeAg表达低于anti-miR122组(p<0.01),GFP组HBeAg表达低于anti-miR122组(p<0.01)。③转染48小时后HBsAg表达:GFP组相对于阴性对照组,HBsAg表达两者没有差异,(p=1.000),anti-miR-122组HBsAg表达高于阴性对照组(p<0.05),hsa-miR-122组HBsAg表达低于anti-miR122组(p<0.01),hsa-miR-122组HBsAg表达低于LNA-antimiR-122组(p<0.05),anti-miR122组HBsAg表达高于GFP组(p<0.05)。④转染48小时后HBeAg表达:LNA-antimiR-122组HBeAg表达高于阴性对照组的表达(p<0.05),hsa-miR-122组HBeAg表达低于LNA-antimiR-122组(p<0.05),GFP组HBeAg表达低于LNA-antimiR-122组(p<0.05)。⑤实验组各组细胞内miR-122的表达:LNA-anti-miR-122组与anti-miR-122组的miR-122含量相对于阴性对照组表达下调。hsa-miR-122组的miR-122含量相对于阴性对照组表达上调。GFP组的miR-122含量相对于阴性对照组表达没有差异。结论:miR-122与HBsAg表达呈负相关;miR-122被下调,HBeAg表达增加。

目录

一、中文摘要

二、英文摘要

三、研究背景

四、论文正文

(一)实验材料

(二)实验方法

(三)实验结果

(四)讨论

(五)结论

(六)小结

(七)参考文献

五、论文综述

六、致谢