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论文说明:名词缩写表
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第一章 文献综述
1基因工程表达系统研究进展
1.1原核表达系统及其应用
1.2真核表达系统及其应用
1.3食品级表达系统研究进展
2 GAL基因家族调控系统和外源基因的表达
2.1 GAL基因的结构和功能
2.2 GAL基因的调控机制
2.3 GAL基因和外源蛋白的表达
3酵母细胞表面展示技术(Yeast Surface Display,YSD)
3.1酵母细胞表面展示表达系统构成
3.2几种酵母细胞表面展示表达系统
3.3酿酒酵母细胞表面展示表达系统应用
3.4目前酿酒酵母表面展示表达系统存在的缺陷
4 β-1,3-1,4-葡聚糖酶研究进展
4.1 β-1,3-1,4-葡聚糖酶的来源
4.2 β-1,3-1,4-葡聚糖酶分子生物学研究进展
4.3 β-1,3-1,4-葡聚糖酶的结构和功能研究
4.4 β-1,3-1,4-葡聚糖酶在工业生产中的应用
5选题背景和研究内容
5.1选题背景
5.2研究内容
第二章 酵母染色体GAL1基因敲除和双重GAL4基因构建
1材料与方法
1.1材料、主要试剂及仪器设备
1.2实验方法
2结果与分析
2.1酵母基因组的提取
2.2酵母染色体第一个GAL1基因敲除
2.3酵母染色体上双GAL4基因构建
2.4酵母染色体第二个GAL1基因的敲除
2.5酵母染色体第三个GAL1基因的敲除
3讨论
4小结
第三章 重组GAL菌株的生长和发酵性能以及遗传稳定性
1材料与方法
1.1材料、主要试剂及仪器设备
1.2实验方法
2结果与分析
2.1重组菌株的GAL基因型遗传稳定性
2.2重组菌株的抗性丢失遗传稳定性
2.3重组菌株在葡萄糖培养基中的生长性能
2.4不同的诱导模式对重组菌株生长性能以及半乳糖利用的影响
2.5重组菌株的热致死温度
3讨论
4小结
第四章 构建以α-半乳糖苷酶为食品级筛选标记的克隆载体
1材料与方法
1.1材料、主要试剂及仪器设备
1.2实验方法
2结果与分析
2.1产α-半乳糖苷酶的酵母菌株筛选
2.2食品级克隆载体的构建
2.3重组质粒的转化和α-半乳糖苷酶表达的平板鉴定
2.4 α-半乳糖苷酶的活性测定
2.5重组菌株的生长性能
3讨论
4小结
第五章 食品级酿酒酵母高效分泌表达系统构建
1材料与方法
1.1材料、主要试剂及仪器设备
1.2实验方法
2结果与分析
2.1枯草芽孢杆菌基因组的提取
2.2片段的扩增
2.3表达载体YGMPA-PM的构建
2.4重组载体YGMPA-PM的转化和重组子鉴定
2.5 β-1,3-1,4-葡聚糖酶在不同GAL菌株中的表达
2.6重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶学性质
3讨论
4小结
第六章 食品级酿酒酵母高效展示表达系统构建
1材料与方法
1.1材料、主要试剂及仪器设备
1.2实验方法
2结果与分析
2.1表达载体YGMPNA-PM的构建
2.2重组质粒的转化和重组子的平板鉴定
2.3 β-1,3-1,4-葡聚糖酶的定位
2.4不同GAL菌株对β-1,3-1,4-葡聚糖酶展示表达的影响
2.5展示表达的β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶学性质
3讨论
4小结
第七章 结论和展望
1结论
2展望
参考文献
致谢
附录
附:个人简历及攻读博士学位期间发表的论文