NLRP3炎症小体在全身型幼年特发性关节炎发病机制中的研究

摘要

目的：
　　研究NLRP3炎症小体及相关炎症因子在全身型幼年特发性关节炎(systemic juvenile idiopathic arthritis，SJIA)中的作用机制。
　　方法：
　　收集2016年3月到2017年10月在我科住院的SJIA患儿33例，以及同时期年龄、性别匹配的非炎症儿童28例。收集SJIA患儿三个时间点:治疗前[SJIA(0W)]、治疗后2周[SJIA(2W)]、治疗后8周[SJIA(8W)]以及对照组PBMC，采用QRT-PCR方法测定细胞裂解物中NLRP3mRNA、ASC mRNA和IL-1βmRNA的转录水平;Western Blot法测定上清液和细胞裂解物中NLRP3、ASC、caspase-1和IL-1β等蛋白表达水平;ELISA法测定上清液中细胞因子IL-1β和IL-18的浓度，Person分析IL-1β，IL-18和IL-6与WBC、PLT、Hb、CRP以及ESR的相关性。
　　结果：
　　与对照组比较，SJIA(0W)组PBMC培养基上清液中IL-1β和IL-18的浓度明显升高，差异有统计学意义(均P＜0.05);PBMC细胞裂解物中NLRP3蛋白表达水平明显降低，IL-1β蛋白表达水平明显升高，而caspase-1蛋白表达水平未见明显差异;PBMC细胞裂解物中NLRP3mRNA、ASC mRNA的转录水平未见明显变化，差异无统计学意义(均P＞0.05)。与SJIA(0W)组比较，SJLA(2W)组PBMC培养基上清液中IL-1β和IL-18的浓度明显降低，差异有统计学意义(均P＜0.05);PBMC细胞裂解物中NLRP3蛋白表达水平明显升高，IL-1β蛋白表达水平明显降低，而caspase-1蛋白表达水平未见明显差异;PBMC细胞裂解物中NLRP3mRNA的转录水平差异无统计学意义(P＞0.05)。与SJIA(0W)组比较，SJIA(8W)组PBMC培养基上清液中IL-18的浓度明显降低，差异有统计学意义(P＜0.05)，但IL-1β浓度差异无统计学意义(P＞0.05)。PBMC细胞裂解物中NLRP3蛋白表达水平未见明显变化，IL-1β蛋白表达水平明显降低，而caspase-1蛋白表达水平未见明显差异(均P＞0.05)。SJIA(0W)组患儿IL-1β与WBC、Hb、血小板、CRP和ESR的相关性分析均无统计学意义(P＞0.05)。IL-18和IL-6与ESR呈正相关，且具有统计学意义(r=0.787，P=0.032;r=0.362，P=0.042);IL-18和IL-6与Hb呈负相关(r=-0.709，P＞0.05;r=-0.434，P=0.013)。
　　结论：
　　SJIA(0W)组PBMC培养上清液中IL-1β和IL-18浓度明显高于对照组，而NLRP3蛋白表达明显减低;SJIA患儿治疗后IL-1β和IL-18浓度明显降低，而NLRP3蛋白表达明显升高，推测IL-1β和IL-18在SJIA炎症机制中起重要作用，但NLRP3炎症小体信号通路并不参与IL-1β和IL-18的调控，其在SJIA的作用尚有待进一步研究。外周血IL-1β和IL-18水平可能成为疾病活动的监测指标。

目录

声明

致谢

摘要

缩略词表

1 引言

2 实验材料和方法

2．1 实验材料

2．2 实验方法

2．3 实验室指标收集

2．4 统计学分析

3 实验结果

3．1 SJIA患儿治疗前后不同时间点临床数据的比较

3．2 对照组和SJIA患儿血清中细胞因子IL-1β的浓度

3．4 对照组和SdlA患儿不同时间点PBMC刺激后上清液中细胞因子IL-1β和IL18的浓度

3．5 对照组和SJIA患儿不同时间点PBMC刺激后细胞中NLRP3／ASC／caspase-1／IL-1β蛋白表达水平

3．6 SJLA患儿PBMC刺激后上清液中IL-1β、IL-18和血清中IL-6与临床指标的相关性分析

4 讨论

5 结论

参考文献

综述

作者简历及研究生在读期间科研成果