声明
致谢
摘要
1绪论
1．1苦苣菜黄网病毒的研究概述
1．1．1苦苣菜黄网病毒的分类与理化性质
1．1．2苦苣菜黄网病毒的分子生物学特性
1．2植物病毒运动蛋白的研究进展
1．2．1植物病毒运动蛋白的定义与分类
1．2．2植物病毒运动蛋白的鉴定方法
1．2．3植物病毒在细胞内的运动
1．2．4植物病毒的胞间运动
1．2．5植物病毒的长距离运输
1．3植物负链RNA病毒运动的研究进展
1．3．1不分节段的植物负链RNA病毒的运动
1．3．2分节段的植物负链RNA病毒的运动
1．4超侵染排阻现象的研究进展
1．4．1超侵染排阻现象的发现和定义
1．4．2超侵染排阻现象的机制研究
1．4．3超侵染排阻现象的意义及其应用
1．5本论文的研究目的和意义
2实验材料与实验方法
2．1实验材料
2．1．1植物及病毒材料
2．1．2载体
2．1．3常用生化试剂和酶
2．2实验方法
2．2．1 RNA水平实验方法
2．2．2蛋白水平实验方法
2．2．3接种实验
2．2．4蛋白互作分析
2．2．5载体构建
2．2．6荧光观察
2．2．7病毒形态相关实验
2．2．8载体构建
3 SYNV运动蛋白sc4特性研究
3．1引言
3．2结果
3．2．1 SYNV运动的最小单元是其病毒核心
3．2．2 sc4在本氏烟上的亚细胞定位
3．2．3 sc4具有体外非特异性结合ssRNA的能力
3．2．4 sc4标签融合蛋白丧失对SYNV运动功能的回补能力
3．2．5 sc4与病毒编码的其他蛋白之间的互作
3．2．6 BFA破坏ER网腔结构抑制SYNV胞间运动
3．3讨论
4植物弹状病毒胞问运动模式研究
4．1引言
4．2结果
4．2．1瞬时表达弹状病毒运动蛋白对ToMV的运动回补
4．2．2瞬时表达弹状病毒运动蛋白对PVX的运动回补
4．2．3不同运动蛋白对SYNV的运动回补研究
4．2．4弹状病毒运动蛋白对TYMaV的运动回补研究
4．2．5 SYNV sc4、RSMV-P3和TYMaV-P3均为外周膜蛋白
4．2．6弹状病毒运动蛋白能够特异性与其自身N蛋白互作
4．2．7 SYNV N-P复合体在se4存在下可以定位到细胞周边
4．3讨论
5 SYNV长距离运动的研究
5．1引言
5．2结果
5．2．1本氏烟维管束组织染色
5．2．2 rSYNV-RFP与rSYNV-RFP Gct徒手切片荧光比较
5．2．2透射电镜观察SYNV侵染的维管组织
5．2．3 rSYNV-P sf GFP的构建与侵染性分析
5．2．4 rSYNV-P sf GFP胞内运动荧光观察
5．2．5 rSYNV-P sf GFP-RFP Gct和rSYNV-GFP-RFP Gct荧光定位比较
5．3讨论
6 SYNV超侵染排阻及其机理研究
6．1引言
6．2结果
6．2．1不同荧光标记的SYNV之间存在超侵染排阻现象
6．2．2过量表达的SYNV M蛋白抑制SYNV的胞间运动
6．2．3 rSYNV-RFP-AM突变体的超侵染排阻能力减弱
6．2．4 M蛋白抑制SYNV MR的转录和复制
6．2．5 M蛋白对MR表达的抑制是通过与N蛋白的互作实现的
6．2．6 M蛋白核定位信号突变体不再抑制MR的转录和复制
6．2．7携带M蛋白核定位信号突变体的rSYNV的SIE能力减弱
6．3讨论
全文总结
参考文献
附录
