乳清蛋白的提取纯化及其多肽水解条件优化的研究

摘要

本文本着可持续发展、充分利用资源的原则，立足于新疆具有地方特色的奶酪制品加工业，将奶制品加工的副产物乳清作为开发重点，通过运用生物技术研制出新型的乳清功能性产品，为乳清资源的高效利用和工业化生产提供理论指导和技术帮助。提高原料乳的综合利用率，进而带来一定的经济效益。
　　(1)本论文通过对CaCl2絮凝沉淀乳清工艺条件的研究，采用正交试验确定最佳絮凝条件。分别研究了pH值、1mol/LCaCl2添加量和温度对乳清中蛋白含量、脂肪含量及透光率的影响；通过三因素三水平正交实验确定乳清的最佳絮凝条件：pH7.5，1mol/LCaCl2的添加量为12mL/L，在60℃水浴缓慢搅拌絮凝15min。在此条件下，处理后的乳清蛋白损失率只有13.6％，脂肪去除率达到86%以上，透光率也有了显著提高。
　　(2)采用超滤和离子交换层析相结合的方法对乳清蛋白进行纯化，选用分子量为10KDa的超滤膜对乳清蛋白进行分离纯化，研究操作温度、操作压力和超滤时间对膜通量及蛋白截留率的影响。通过实验得出最佳分离条件：采操作压力为0.2MPa、温度35℃~40℃条件下，膜通量最大；超滤时间100min后就需对超滤膜进行清洗。选用阴离子交换树脂对其进一步纯化，研究不同树脂、不同上样缓冲液pH值和不同洗脱液离子强度对蛋白吸附程度的影响。结果表明：经过筛选DEAEA-52为柱填充材料，在pH8.35，洗脱液离子浓度0.8mol/L的条件下，提取纯化的蛋白含量为87.4%，并且通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得所提取的蛋白中含有高纯度的β-Lg和α-La。
　　(3)使用碱性蛋白酶水解乳清蛋白制备乳清蛋白多肽，采用正交实验确定最佳酶解条件。分别研究酶与底物质量比、底物浓度、温度、pH值对水解度的影响；采用正交实验设计，确定碱性蛋白酶制备蛋白多肽的最佳水解条件：pH9.0、水解温度50℃、酶与底物质量比为7%、底物浓度2%、水解时间3h，最优工艺条件下水解度为27.6%。

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前 言

第一章 文献综述

1.1 乳清蛋白的组成

1.2 乳清蛋白的分类

1.3 乳清蛋白的功能特性

1.4 乳清蛋白研究现状

1.5 乳清蛋白分离技术

1.6 乳清蛋白在食品中的应用

1.7 生物活性肽简述

1.8 课题研究背景及意义

1.9 课题研究内容

第二章 超滤法浓缩乳清前处理的研究

2.1 实验材料与仪器

2.2 实验方法

2.3 结果与分析

2.4小结

第三章 乳清蛋白提取纯化工艺条件的研究

3.1 实验材料与仪器

3.2 实验方法

3.3 结果与分析

3.4 小结

第四章 乳清蛋白多肽水解条件优化的研究

4.1 实验材料与仪器

4.2 实验方法

4.3 结果与分析

4.4 小结

第五章 结论与展望

5.1 结论

5.2 创新点

5.3 展望

参考文献

致谢

作 者 简 介

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