中药复方宫炎净中主要有效成分的提取及抗炎活性研究

摘要

目的:本试验通过不同溶剂对中药复方宫炎净进行提取,测定各提取物不同浓度下的体外抑菌作用,确定体外抑菌较好的提取物及其浓度;通过活性试验,确定用于提取中药复方宫炎净的溶剂以及最佳的用药剂量;确定中药复方宫炎净有效成分,采用L9(34)设计正交实验优化复方宫炎净的提取工艺。为中药复方宫炎净的进一步开发利用、研制新剂型奠定基础。
　　方法:试验一:采用渗漉法,分别用石油醚、70％乙醇、蒸馏水对复方宫炎净进行提取,采用琼脂打孔法,通过比较抑菌圈的大小来判断不同溶剂提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌的抑菌活性大小。以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为供试菌,测定复方宫炎净醇提物、水提物的最小抑菌浓度,同时探讨了培养基pH、培养基含糖量以及温度和紫外线对醇提物、水提物抑菌活性的影响。
　　试验二:分别给予小鼠生理盐水、地塞米松及高、中、低剂量的石油醚提取物、乙醇提取物、水提取物,用二甲苯致炎,测定小鼠耳廓肿胀率。此外,腹腔注射体积分数为0.7%的冰醋酸致炎,于590 nm波长处测腹腔液OD值。
　　试验三:建立二甲苯所致耳廓肿胀、蛋清所致足趾肿胀、棉球所致肉芽肿小鼠炎症模型,通过测定小鼠耳廓肿胀率、足趾肿胀率以及棉球所致肉芽组织重来判定乙醇提取物的抗炎效果。
　　试验四:通过探究乙醇体积分数、超声提取时间、超声提取次数以及料液比等单因素对提取效果的影响试验,以盐酸水苏碱为标准品,采用 L9(34)正交设计法优选复方中总生物碱的提取工艺。
　　结果:试验一:醇提物、水提物抑菌效果较好。醇提物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为0.00625 g/mL,对大肠杆菌和枯草杆菌的最低抑菌浓度为0.125 g/mL;水提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度为0.125 g/mL。温度和紫外线处理对乙醇提取物、水提物抑菌效果没有明显影响;随培养基的 pH值增大两种溶剂提取物抑菌活性均减弱,随培养基含糖量的增加,两种溶剂提取物的抑菌活性均呈现增强趋势。
　　试验二:乙醇提取物各剂量组的耳廓肿胀率均显著低于生理盐水组和石油醚组(P<0.01),并以乙醇中剂量提取物效果最佳;乙醇提取物各组和地塞米松组的腹腔毛细血管通透性均极显著低于除地塞米松组外的各组(P<0.01),并且乙醇中剂量组显著低于地塞米松组(P<0.05)。显示乙醇可作为提取该复方有效成分的最佳提取溶剂。
　　试验三:中剂量乙醇提取物能够显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀率,显著低于高、低剂量乙醇提取物组(P<0.05),与地塞米松组差异不显著(P>0.05);各组均能明显降低蛋清所致小鼠足趾肿胀率,其中中剂量乙醇提取物组显著低于高、低剂量乙醇提取物组(P<0.05),极显著低于生理盐水组(P<0.01),与地塞米松组差异不显著(P>0.05);中剂量乙醇提取物能明显抑制棉球所致小鼠肉芽组织增生且显著低于高、低剂量乙醇提取物组(P<0.05),极显著低于生理盐水组(P<0.01),与地塞米松组差异不显著(P>0.05)。
　　试验四:乙醇体积分数为70%,超声提取时间为25 min,超声提取3次,料液比为1:10时为中药复方宫炎净中总生物碱的最佳提取工艺。并且在影响奶牛中药复方宫炎净中生物碱提取的因素中,影响大小依次为料液比、溶剂浓度、超声提取次数、超声提取时间。
　　结论:以70%乙醇为溶剂的提取物具有较好的体外抑菌作用和体内抗炎作用,并以乙醇体积分数为70%,超声提取时间为25 min,超声提取3次,料液比为1:10时为中药复方宫炎净的最佳提取工艺。

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前言

第一章 综述

1 中草药制剂的研究进展

2 中药提取方法的研究

第二章 中药复方宫炎净不同溶剂提取物体外抑菌活性及稳定性研究

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

4 结论

第三章 中药复方宫炎净不同溶剂提取物对小鼠耳廓肿胀及毛细血管通透性的影响

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

4 结论

第四章 中药复方宫炎净的乙醇提取物抗炎作用研究

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

4 结论

第五章中药复方宫炎净乙醇提取物中生物碱的提取工艺及含量测定研究

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

4 结论

全文总结

创新点

参考文献

致谢

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