选择性S1PR1调节剂对脑出血模型保护作用的研究

摘要

背景和目的：临床前期及临床概念验证性研究已经表明1-磷酸鞘氨醇受体(Sphingosine-1-Phosphate Receptor, S1PR)调节剂芬戈莫德（Fingolimod）可以改善脑出血患者临床转归。然而其在脑出血病程中，究竟作用于何种S1PR亚型而起到保护作用，仍不是十分清楚。此外，由于芬戈莫德作用于S1PR的多种亚型而引起的多种副作用，限制了其在卒中患者治疗中的应用。而RP101075是选择性 S1PR1激动剂，较芬戈莫德具有更好的药物安全性。在本试验中，我们主要研究了PR101075在脑出血小鼠模型中的治疗作用。
　　方法：通过自体血小鼠脑基底节注入的方法，在278只雄性C57BL/6小鼠中成功建立脑出血模型。脑出血模型鼠在术后30分钟进行随机分组，各组分别给予RP101075、溶剂以及S1PR1阻滞剂W146灌胃，每天一次，连续三天。脑出血模型建立后，评估其神经功能缺损、脑水肿、脑内免疫细胞增殖程度、血脑屏障完整性以及细胞凋亡程度。
　　结果：RP101075显著减轻了脑出血所引起的神经功能缺损以及脑水肿。而S1PR1阻滞剂W146能够阻断RP101075的这种保护作用。RP101075减少了脑出血损伤后浸润至中枢系统的淋巴细胞、中性粒细胞以及小胶质细胞的数量，同时减少多种细胞因子的表达。RP101075保护了血脑屏障的完整性，并对神经元起到直接保护作用，降低了细胞凋亡程度。
　　结论：RP101075通过作用于S1PR1，发挥其免疫调节作用，从而在脑出血模型起到了保护作用，并且其较芬戈莫德具有更好的药理学特性。以上几点增加了对其作用机制进一步研究，以及实现临床转化的可能性。

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缩略语/符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

1 材料和方法

1.1 实验动物

1.2 脑出血模型

1.3 实验设计和药物管理

1.4 神经功能评分和生存分析

1.5 质谱分析测定RP101075在血液和脑组织中的分布

1.6 核磁共振（Magnetic Resonance Imaging MRI）

1.7 流式细胞术检测

1.8 利用伊文斯兰蓝染料的渗漏以评估血脑屏障完整性

1.9紧密连接的蛋白印记分析

1.10 原代神经元的培养

1.11 神经元凋亡的分析

2. 结果

2.1 RP101075能够缓解脑出血后神经功能缺陷并增加模型动物的生存率

2.2 RP101075能够改善脑出血后脑水肿的严重程度

2.3 RP101075对脑出血后免疫应答的影响

2.4 RP101075对脑出血后血脑屏障通透性的保护作用

2.5 RP101075对脑出血在体及离体模型中神经元凋亡的保护作用

3 讨论

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述:脑出血的免疫干预

致谢

个人简历