紫杉醇-透明质酸复合制剂的体外活性及脂质组学研究

摘要

为了提高紫杉醇制剂的药物靶向性，降低制剂的毒副作用，本课题组以透明质酸为药物载体，制备了复合型紫杉醇-透明质酸注射用冻干制剂，既达到了药物缓释的效果，又利用了透明质酸对癌细胞的靶向性，提高了紫杉醇的生物利用度，在此基础上，本文对复合制剂进行了体外抗肿瘤活性及脂质组学研究。 对紫杉醇-透明质酸复合制剂进行了体外抗肿瘤活性研究，结果表明制剂对Hela细胞的抑制率可达到80％左右。不同分子量透明质酸的复合制剂，对细胞的抑制作用并没有显著性差异。综合考虑本课题组对制剂工艺及稳定性的研究结果，确定31w制剂为活性筛选的较好结果。31w复合制剂作用后，Hela细胞直接启动凋亡，24h凋亡率可达56.8％，并伴随着一定的G2/M期积累现象。 基于LC/ESI/MSn初步构建了Hela细胞磷脂图谱，确定了PG、PE、PC、PI、PS及PA共6类磷脂112种磷脂分子的结构，并进行了定量分析，研究了制剂作用于Hela细胞后磷脂代谢的变化，发现制剂作用6h后，PG、PE、PI、PS的总含量均有了显著性的升高，而PC、PA总含量无显著性变化。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一章文献综述

1.1紫杉醇及其制剂的研究进展

1.1.1紫杉醇的药理作用

1.1.2紫杉醇的剂型及其研究进展

1.2透明质酸的研究现状及其应用进展

1.2.1透明质酸综述

1.2.2透明质酸与肿瘤细胞的作用

1.2.3透明质酸在抗癌治疗中的应用现状

1.3膜脂及脂质组学

1.3.1膜脂

1.3.2脂质组学

1.3.3质谱在脂质组学研究中的应用

1.4本文的研究意义和主要研究内容

1.4.1研究意义

1.4.2研究内容

第二章紫杉醇-透明质酸复合制剂的体外活性研究

2.1实验材料与方法

2.1.1实验仪器

2.1.2实验试剂

2.1.3紫杉醇-透明质酸复合制剂的制备

2.1.4紫杉醇标准曲线的绘制及含量测定

2.1.5细胞系与细胞培养

2.1.6 MTT法检测细胞活力

2.1.7流式细胞仪分析细胞周期

2.1.8统计学处理

2.2结果与讨论

2.2.1紫杉醇标准曲线的绘制

2.2.2紫杉醇-透明质酸复合制剂的体外活性筛选

2.2.3紫杉醇-透明质酸复合制剂对细胞周期的影响

2.3小结

第三章Hela细胞磷脂图库的初步建立

3.1实验材料与方法

3.1.1仪器和试剂

3.1.2磷脂定性实验条件

3.1.3Hela细胞总磷脂的提取

3.1.4磷脂的结构定性分析

3.2结果与讨论

3.2.1Hela细胞中磷脂种类分析

3.2.2Hela细胞中各磷脂分子结构的确定

3.3小结

第四章复合制剂作用下Hela细胞磷脂代谢差异的分析

4.1实验材料与方法

4.1.1仪器和试剂

4.1.2Hela细胞总磷脂的提取

4.1.3磷脂定量实验条件

4.1.4磷脂含量的测定

4.1.5统计学处理

4.2结果与讨论

4.2.1Hela细胞磷脂含量的测定

4.2.2 Hela细胞磷脂代谢差异的分析

4.3小结

第五章结论与展望

5.1结论

5.2展望

参考文献

发表论文和科研情况说明

致 谢