一株产黄色素红曲霉Monascus HB-5的发酵条件及色素稳定性、安全性研究

摘要

实验室从红曲霉(Monascus HB-2)中分离到一株单产黄色素红曲霉：Monascus HB-5。其生物学特性表现为：气生菌丝发达，在平血PDA培养基上呈中间黄色，边缘白色的圆形隆起。该菌无性繁殖产生分生孢子，卵形或梨形，链状或单个生于菌丝体的顶端或分支，大小为(4～10)×(5～12)μm；有性繁殖形成球形子囊果，大小为(15～19)×(20～24)μm，子囊果内生子囊孢子，大小为(3～5)×(2～4)μm。 对该菌的发酵条件进行了初步探讨，发现其生长的最适pH为4.0～5.0，最适温度为30～32℃，适合的碳源为玉米粉，氮源为硝酸胺。该菌的发酵产物二_黄色素的色调为黄色，仅在370nm处存在最大吸收峰。该菌液体发酵的最适条件为：接种量为10％，pH为4.6～5.7，对培养基成分进行了正交优化实验，实验结果表明：发酵的最优培养基组合为玉米粉：10％，硝酸胺：0.2％，磷酸二氢钾：0.2％，硫酸镁：0.08％。各因素中，玉米粉(碳源)的R值最大，说明它对产色素的影响最大，硫酸镁次之。采用以上配方多次补充实验，摇瓶发酵结果均表明此配方可行。摇瓶色价基本稳定在200u／ml左右。对该菌的固体发酵条件作了初步研究，其固体发酵最适条件为：以籼米作为发酵底物，初始含水量为50％，并在培养过程中12、36，48h时分三次添加6％的无菌水，另外添加蛋白胨3％，玉米粉3％，酵母膏1％对产色素有明显的促进作用，最终发酵产物色价可达1032u/g。 以两种天然食用色素(栀子黄、红曲红)作为对照对该菌产生黄色素的稳定性做了初步研究，研究表明红曲黄无论在光稳定性还是热稳定性上均略优于栀子黄色素和红曲红色素，并且对添加剂十分稳定。 对红曲中citrinin检测：实验室经双向薄层TLC法检测，以氯仿：甲醇：乙酸(65:25:1)为第一相纵向展开，以苯:乙酸乙酯:甲酸(6:3:1)为第二相展开剂侧向展开，实验结果表明红曲黄色素发酵液中citrinin的含量小于0.1mg/L(最小检出限:0.4μg)。小鼠经口急性毒性试验：实验通过小鼠灌胃法进行急性毒性试验，结果表明无法测出LD50。最大耐受量实验中一日最大给药量为48g/kg，实验期间无动物死亡，所有观察指标均为正常，证明红曲黄色素无明显的急性毒性作用。

目录

文摘

英文文摘

引言

1.材料与方法

2. 实验结果与分析

3讨论

参考文献

文献综述:天然食用黄色素的研究进展

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致谢

在读期间科研成果