一株双梭隔梭孢产黄色素的培养条件优化及黄色素性质研究

摘要

本论文主要针对双梭隔梭孢（Septafusidium bifusisporum）所产黄色素进行了系统研究，研究内容包括：色素组分分离纯化和鉴定；通过细胞毒性实验，对色素的毒性进行初步评价；对高产菌株产色素培养条件进行优化，确定最佳培养条件；优化色素提取工艺，为开发利用提供依据；此外，还对菌株所产色素的理化性质进行了研究。
　　 通过HPLC-MS分析发现，双梭隔梭孢所产黄色素并非为单一化合物，而是多种黄色物质的混合物，但其最主要成分的分子式为C26H32O9，该化合物在227nm和411nm下有特征吸收峰。以该化合物的分子式和特征吸收波长为条件，从Chapman&Hall天然产物数据库中查询，发现没有与之相匹配的已知化合物，因此可初步判断该化合物是一新化合物。
　　 通过CHO细胞毒性实验，发现菌株RCEF3669所产色素无细胞毒性，是一种安全性较高的天然色素，具有较高的开发价值。
　　 通过对菌株产黄色素的发酵条件优化，发现菌株RCEF3669产黄色素的最佳培养基组成为：葡萄糖20 g/L，甘油20 g/L，玉米粉30 g/L，黄豆粉20 g/L，NH4NO32 g/L，MgSO4·7H2O1.0g/L，KH2PO43.0g/L，VB0.4g/L，CaCl20.5g/L；最佳发酵条件为：种龄为3d，接种量为7.5％，培养温度为25℃，培养时间为10d。
　　 通过对黄色素提取工艺的研究，发现有机溶剂浸提的最佳条件为：提取溶剂为甲醇，浸提温度为45℃，浸提时间为120min，料液比为1：20，提取级数为2级。通过超声波辅助提取与有机溶剂浸提的比较研究，发现超声波辅助提取的效果较好，其最佳提取条件为：超声波提取功率为80W，提取时间为40min，提取温度40℃。
　　 对该黄色素理化性质的研究发现，该黄色素的最大吸收波长为411nm，刚好为其主要色素组分的最大吸收波长；该色素易溶于甲醇、乙腈、正丁醇、二甲基亚砜等有机溶剂；该色素在暗室和日光下有很强的稳定性，但是紫外光对色素的稳定性却有较大的影响；该色素具有一定的热稳定性，能够承受一定程度的高温（≤75℃）处理；该色素在Na2SO3、维生素C、防腐剂苯甲酸钠和白砂糖存在的条件下有较好的稳定性，柠檬酸对于该黄色素有一定的增色作用，而氧化剂H2O2对色素的稳定性有很大的影响，随着处理时间的增加，色素的残存率明显降低；在研究金属离子对黄色素稳定性影响的实验中发现，除Fe3+的加入使色素吸光度略有降低外，大多数金属离子不会对色素的稳定性产生太大的不良影响。

目录

文摘

英文文摘

声明

1文献综述

2引言

3材料与方法

4结果与分析

4.1色素物质的分离纯化和质谱分析

4.1.1色谱条件的确定

4.1.2色素组分的分离与制备

4.1.3色素组分的纯度鉴定

4.1.4色素组分的液质分析

4.2色素的细胞毒性实验

4.3菌株产黄色素培养条件的优化

4.3.1营养性因素对RCEF3669菌株产黄色素的影响

4.3.2非营养性因素对RCEF3669菌株产黄色素的影响

4.3.3培养基及培养条件优化前后对黄色素产量的影响

4.4黄色素提取工艺的研究

4.4.1有机溶剂提取实验

4.4.2超声波辅助提取实验

4.4.3两种提取方法的比较

4.5黄色素理化性质和应用研究

4.5.1色素的呈色变化

4.5.2色素的溶解性研究

4.5.3色素稳定性研究

5讨论

6结论

参考文献

致谢

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