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风湿宁对风寒湿痹证CIA模型TLR4/NF-κB信号通路的作用机制研究

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引言

第一部分 不同外感致病因素对病证结合CIA模型建立的比较研究

1 实验材料

1.1 实验动物

1.2 实验药物及试剂

1.3 实验仪器

2 实验方法

2.1 RA大鼠模型的建立

2.2 RA大鼠模型的分组及给药

2.3 标本采集及指标检测

2.4 统计学方法

3 结果

3.1 各组大鼠一般状态的观察结果

3.2 各组大鼠实验期间体质量变化

3.3 各组大鼠实验期间足掌温度变化

3.4 各组大鼠实验期间关节炎指数变化

3.5 各组大鼠实验期间关节肿胀度变化

3.6 各组大鼠实验期间血清RF、ACPA含量

3.7 各组大鼠踝关节组织病理学观察结果

4 实验小结

5 讨论

5.1 治痹经方的选择及意义

5.2 病证结合CIA模型的建立及评价

5.3 风湿宁对三种CIA模型的影响

第二部分 近红外荧光探针在风寒湿痹证CIA小鼠模型中成像的应用研究

1 实验材料

1.1 实验动物

1.2 实验药物及试剂

1.3 实验仪器

2 实验方法

2.1 风寒湿痹证CIA小鼠模型的建立及给药

2.2 指标检测

2.3 统计学方法

3 结果

3.1 风湿宁对风寒湿痹证CIA小鼠模型一般状态的影响

3.2 风湿宁对风寒湿痹证CIA小鼠模型足掌疼痛阈值的影响

3.3 风湿宁对风寒湿痹证CIA小鼠模型关节炎指数的影响

3.4 风湿宁对风寒湿痹证CIA小鼠模型踝关节宽度的影响

3.5 风湿宁对风寒湿痹证CIA小鼠模型近红外荧光活体成像的影响

4 实验小结

5 讨论

5.1 阳性药物的选择

5.2 风湿宁对模型小鼠足掌疼痛阈值的影响

5.3 风湿宁对模型小鼠关节炎指数与踝关节宽度的影响

5.4 风湿宁对模型小鼠近红外荧光活体成像的影响

第三部分 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织中TLR4/NF-κB信号通路的作用机制研究

1 实验材料

1.1 实验动物

1.2 实验药物及试剂

1.3 实验仪器

2 实验方法

2.1 风寒湿痹证CIA大鼠模型的建立及筛选

2.2 风寒湿痹证CIA大鼠模型的分组及给药

2.3 标本采集及指标检测

2.4 统计学方法

3 结果

3.1 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型一般状态的影响

3.2 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型关节炎指数的影响

3.3 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型关节肿胀度的影响

3.4 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型血清RF、ACPA含量的影响

3.6 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型血清抗炎细胞因子含量的影响

3.7 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型脾脏与胸腺指数的影响

3.9 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织细胞凋亡的影响

3.10 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织中c-IAP1、XIAP、Caspase-3与C

3.11 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-κB

3.12 风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-κB蛋

4 实验小结

5 讨论

5.1 风湿宁的来源及方析

5.2 风湿宁通过下调炎性细胞因子表达,上调抗炎细胞因子活性,是发挥其治疗作用的机制之一

5.3 风湿宁通过调节免疫功能,是发挥其治疗作用的机制之一

5.4 风湿宁可诱导滑膜细胞调亡,抑制滑膜细胞异常增殖,是发挥其治疗作用的主要机制之一

5.5 风湿宁可抑制TLR4/NF-κB信号通路异常活化,是发挥其治疗作用的主要机制之一

第四部分 风湿宁含药血清对风寒湿痹证CIA-FLS增殖、凋亡和TLR4/NF-κB信号通路的作用

1 实验材料

1.1 滑膜组织来源

1.2 制备含药血清的实验动物

1.3 实验药物及试剂

1.4 实验仪器

2 实验方法

2.1 风寒湿痹证CIA模型大鼠滑膜细胞体外分离培养

2.2 CIA-FLS细胞免疫荧光鉴定

2.3 含药血清的制备

2.4 CIA-FLS细胞分组及给药

2.5 CCK-8法检测CIA-FLS细胞增殖

2.6 TUNEL法检测CIA-FLS细胞凋亡

2.7 ELISA法检测CIA-FLS细胞培养上清液中细胞因子含量

2.8 Real-time PCR法检测CIA-FLS细胞中TLR4、MyD88、IκB-α与NF

2.9 Western Blot法检测CIA-FLS细胞中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-

2.10 统计学方法

3 结果

3.1 CIA-FLS细胞原代培养及形态学观察

3.2 CIA-FLS细胞免疫荧光鉴定

3.3 风湿宁含药血清对CIA-FLS细胞增殖的影响

3.3 风湿宁含药血清对CIA-FLS细胞凋亡的影响

3.4 风湿宁含药血清对CIA-FLS细胞培养上清液中细胞因子含量的影响

3.5 风湿宁含药血清对CIA-FLS细胞中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-κB mRNA

3.6 风湿宁含药血清对CIA-FLS细胞中TLR4、MyD88、IκB-α与NF-κB蛋白表达的

4 实验小结

5 讨论

5.1 CIA-FLS细胞的原代培养及鉴定

5.2 风湿宁含药血清通过抑制CIA-FLS细胞增殖,促进其凋亡,是发挥其治疗作用的机制之一

5.3 风湿宁含药血清通过下调CIA-FLS细胞上清液中炎性细胞因子表达,上调抗炎细胞因子活性,是

5.4 风湿宁含药血清通过抑制CIA-FLS细胞中TLR4/NF-κB信号通路异常活化,是发挥其治

创新性与特色

问题与展望

致谢

参考文献

综述

TLRs/NF-κB信号通路与类风湿关节炎相关研究进展

附件1:在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

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