人工合成偶氮类色素胭脂红的食品检测和毒性研究

摘要

目的：了解部分上海市售食品中人工合成偶氮类色素胭脂红的含量水平，并探讨其对黑腹果蝇及体外培养NIH3T3细胞的毒性作用，为食品卫生学研究提供实验数据。 方法：①采用紫外可见吸收光谱确定检测波长，运用高效液相色谱技术，结合溶剂提取的超声波震荡、摇床振摇、低温浓缩等前处理方法，对部分上海市售食品中的胭脂红进行定性、定量分析；②经口喂饲果蝇不同浓度胭脂红，通过急性毒性试验测定胭脂红LC5O，生存试验检测果蝇寿命，比色法测定不同时间果蝇体内总SOD活性及MDA含量；③通过RT-PCR检测不同组果蝇头部Cu,Zn-sod、Mn-sod,及t-cat 3种抗氧化酶基因的mRNA表达差异；④在单层培养的3T3细胞中加入不同浓度胭脂红染毒培养，用SCGE检测3T3细胞DNA的损伤情况。 结果：①根据现有国家标准，在随机采集的18种市售被检测食物样品中，5种禁止添加人工色素的食品违规添加胭脂红，1种胭脂红含量超标，4种添加量接近国家标准允许的极限。②急性毒性试验中，胭脂红浓度与雌雄果蝇的死亡率呈剂量.反应关系。生存试验中各浓度组雌雄果蝇的半数死亡时间、平均寿命及平均最高寿命均较对照组缩短(P<0.05或P<0.01)，且存在剂量.反应关系。随着胭脂红染毒时间的延长和染毒浓度的增加，雌雄果蝇体内SOD活力明显下降、MDA含量明显升高(P<0.05)，呈剂量.反应关系。胭脂红对雄性果蝇的损害大于雌性。③胭脂红染毒20天后，雌雄果蝇体内Mn-sod的Mrna表达水平均较对照组降低。④各染毒组彗星细胞率、彗星细胞的尾长、尾部DNA含量及尾矩与胭脂红浓度正相关，呈剂量反应关系。 结论：部分上海市售食品中存在人工合成色素胭脂红滥用的情况。胭脂红可缩短果蝇寿命，促进果蝇体内脂质过氧化反应，降低SOD活性和Mn-sod的Mrna表达水平，破坏氧化和抗氧化系统的平衡。胭脂红对体外培养3T3细胞DNA有损伤作用，具遗传毒性。鉴于本研究中显示的胭脂红的毒性作用，建议降低食品卫生标准中胭脂红的最高允许添加量，进行安全性再评价。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：符号说明

声明

第1章引言

1.1结构与理化性质

1.2生物学效应

1.2.1吸收、代谢和排泄

1.2.2急性毒性

1.2.3慢性毒性

1.2.4致敏性

1.2.5致突变性

1.2.6生殖与发育毒性

1.2.7神经行为毒性

1.2.8细胞毒性

1.3毒性机制研究

1.4实验技术路线

第2章 市售食品中胭脂红的HPLC测定

2.1材料与方法

2.1.1仪器与试剂

2.1.2采样与处理

2.1.3条件与方法

2.2结果

2.3讨论

第3章 胭脂红对黑腹果蝇寿命及SOD和MDA的影响

3.1材料与方法

3.1.1实验动物

3.1.2仪器与试剂

3.1.3果蝇培养基的制作

3.1.4实验方法

3.2结果

3.2.1胭脂红对果蝇的急性毒性

3.2.2胭脂红对果蝇寿命的影响

3.2.3胭脂红对果蝇SOD活性的影响

3.2.4胭脂红对果蝇MDA含量的影响

3.3讨论

3.3.1胭脂红对果蝇寿命及SOD和MDA的影响

3.3.2对胭脂红食品添加量的探讨

第4章 胭脂红对果蝇抗氧化酶基因表达的影响

4.1材料与方法

4.1.1实验动物

4.1.2仪器与试剂

4.1.3实验方法

4.2结果

4.2.1果蝇头部组织总RNA的质量鉴定

4.2.2胭脂红对果蝇头部组织中t-cat、Cu,Zn-sod及Mn-sod基因表达的影响

4.3讨论

4.3.1果蝇RNA的质量检测

4.3.2胭脂红对果蝇抗氧化酶mRNA表达的影响

第5章 胭脂红对3T3细胞DNA损伤的SCGE检测

5.1材料与方法

5.1.1细胞株

5.1.2试剂

5.1.3溶液

5.1.4主要仪器

5.1.5细胞培养

5.1.6细胞染毒

5.1.7细胞存活率测定

5.1.8单细胞凝胶电泳

5.1.9观察和图像采集

5.1.10数据处理

5.1.11统计方法

5.2结果

5.2.1胭脂红对3T3细胞形态的影响

5.2.2胭脂红致3T3细胞损伤的碱性SCGE图像

5.2.3胭脂红致3T3细胞拖尾率的比较

5.2.4胭脂红对3T3细胞DNA的损伤情况

5.3讨论

5.3.1关于SCGE

5.3.2胭脂红对3T3细胞DNA的损伤

第6章 结论与展望

6.1结论

6.2研究特色

6.3进一步工作的方向

致谢

参考文献

个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果