游离的LIF受体α亚基胞内区远膜端对HL-60细胞增殖分化的影响

摘要

该研究首先成功筛选并建立了两种白血病(HL-60)细胞株即pcDNA3.0-190CT3重组子白血病细胞株、pcDNA3.0空载体白血病细胞株,利用细胞计数、免疫组化、免疫沉淀、蛋白印迹、流式细胞仪等生物学实验方法,从形态学、蛋白表达量、磷酸化水平等方面分析细胞形态变化、细胞增殖核抗原(PCNA)和CD15在三种细胞株中的表达情况及Stat3、P44/42 MAPK磷酸化水平,进而分析190CT3是否可以替代LIF启动下游的信号转导,进而抑制白血病细胞的增殖并促进其分化;另一方面我们通过不同细胞株注射的裸鼠各器官的增生及淋巴细胞侵润情况的比较,分析不同细胞株的恶性程度,进而分析在动物体内190CT3是否有抑制白血病细胞增殖的作用.结果表明:190CT3 cDNA可以在白血病HL-60细胞中表达,并且在没有LIF刺激的情况下,替代LIF,独立开启下游的信号转导通路,激活Stat3和P42/44 MAPK等信号分子.通过PCNA的表达水平说明了细胞的增殖情况,粒细胞表面标志CD15的表达水平说明了白血病HL-60细胞向粒细胞系的分化情况.该研究结果表明:190CT3重组子可以在白血病HL-60细胞中表达,且在没有LIF刺激的情况下可以激活下游的信号分子,启动LIFR的信号转导,抑制白血病HL-60细胞的增殖,促进其分化.这同时也说明,190CT3在启动白血病细胞LIFR的信号通路中发挥了重大作用.这也提示我们,可构建190CT3分子代替LIF诱导白血病细胞生长抑制,同时克服白血病细胞对LIF不敏感的不足以及非生理剂量的LIF对

目录

第一部分190CT3对白血病HL-60细胞增殖分化的影响

前言

Ⅰ cDNA3.0-190CT3重组体的制备

一、材料与方法

二 实验结果

Ⅱ细胞株的筛选鉴定

一、材料与方法

二、实验结果

Ⅲ190CT3对白血病HL-60细胞株增殖分化的影响

一、体外细胞实验

二、体外动物实验

三、讨 论

第二部分190CT3对白血病HL-60细胞中STAT3、P42/44 MAPK表达的影响

前 言

一、材料与方法

二 实验结果

三、讨论

小 结

参考文献

综述部分

白血病抑制因子受体及其介导的信号转导途径

造血调控的主要细胞因子及通路

英文缩略语

硕士期间形成和发表论文情况

致谢