Nogo-66受体在大鼠小脑皮质胶质细胞缝隙连接处的定位和人源性的成肌细胞和肌管细胞表达β-Tubulin Ⅲ

摘要

近年来,多家实验室采用原位杂交技术,观察了NgR mRNA分子在大鼠、小鼠和人神经系统中的分布,结果显示NgR mRNA分子广泛表达于神经元中,如皮质各层、海马的CAl~CA4神经元、齿状回、杏仁核、丘脑、红核、黑质、尾状核、小脑的蒲肯野氏细胞层、颗粒细胞层及小脑深核的神经元.而一些神经元却不表达NgR mRNA分子,如小脑的分子层等,而且在不同的神经元,NgR的表达量也不同,如小脑的颗粒层NgRmRNA分子信号比蒲肯野氏细胞层强得多.Wang等采用免疫组织化学染色发现成年小鼠的脑和脊髓中NgR蛋白有很广泛的分布,主要表达于神经元中.他们在小脑的分子层、蒲肯野氏细胞层及颗粒细胞层都检测到NgR蛋白质的表达,而且他们的结果提示,NgR的蛋白质和它的mRNA的表达水平不能很好地匹配.尽管目前有研究表明NgR mRNA和NgR蛋白可以高水平地表达于小脑,但是NgR蛋白在小脑的超微定位还不清楚.该实验试图系统研究NgR在大鼠小脑皮质的细胞分布和超微定位.该研究利用Western Blot、免疫组织化学染色、免疫荧光双标染色及共聚焦显微镜技术和免疫电镜.最近一些研究表明外源性的骨髓干细胞在离体和移植入脑内后可分化为神经元.然而,骨髓干细胞有它本身的局限性.一种可从病人体内获得的即容易又安全的干细胞来源-肌肉干细胞将是非常令人鼓舞.已有实验证明从大鼠肌肉中分离出的不定向的多向分化潜能的肌肉干细胞,在一定条件下能诱导分化为神经细胞.该研究试图确定来源于成年人人骨骼肌的干细胞,离体条件下能否分化为神经细胞,为今后骨骼肌干细胞应用于移植治疗神经系统损伤和疾病打下基础.我们采用免疫细胞化学染色并结合Western Blot及RT-PCR等技术对经神经元和胶质细胞诱导分化液作用后人的成肌细胞,增殖培养液培养后的各代人成肌细胞及仅含2％HS分化液分化形成的肌管细胞进行神经元标志物Ⅲ型β-Tubulin及Neurofilament68kD和胶质细胞标志物GFAP系统表达研究.

目录

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缩略语表

前 言

第一部分

文献回顾

实验研究部分

引 言

材料和方法

主要实验结果

讨 论

参考文献

附 录

第二部分

文献回顾

实验研究部分

引 言

材料和方法

主要实验结果

讨 论

参考文献

附 录

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