KAI1基因真核表达载体的构建及其对卵巢癌细胞侵袭抑制作用的体外研究

摘要

为进一步探讨KAI1基因抑制卵巢癌细胞侵袭转移的作用机制,实验研究分为两部分:1、我们从人胎盘组织中提取总RNA进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),扩增出KAI1基因编码片段,并重组入真核表达质粒pcDNA3.1(+),经酶切鉴定测序证实了pcDNA3.1(+)-KAI1真核表达载体的成功构建.2、我们通过脂质体介导KAI1 cDNA转染高转移性人卵巢癌细胞系HO-8910PM,免疫细胞化学S-P法检测转染前后细胞内KAI1蛋白表达情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、平板克隆形成实验观察KAI1对细胞增殖能力的影响;细胞黏附实验、体外侵袭力实验比较转染前后细胞侵袭能力的变化.结果显示:转染KAI1 cDNA后HO-8910PM细胞内可检测到KAI1蛋白的稳定表达,细胞增殖能力较前无明显变化,侵袭能力明显下降;提示;外源性肿瘤转移抑制基因KAI1可通过脂质体有效转染高转移性人卵巢癌细胞系HO-8910PM,并通过抑制细胞与细胞和/或细胞与细胞外基质的黏附降低其侵袭能力,它有望成为卵巢癌转移抑制治疗的新的候选基因,并为进一步体内研究奠定了实验基础.

目录

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缩略语表

前 言

文献回顾

第一部分KAI1基因真核表达载体的构建

1引言

2材料

3方法

4结果

5讨论

第二部分KAI1对卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响

1引言

2材料

3方法

4结果

5讨论

小 结

参考文献

附 录

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致 谢