结核分枝杆菌HSP65与hIL-2融合基因的DNA疫苗和重组分枝杆菌疫苗的实验研究

摘要

实验目的：构建可表达HSP65-IL-2融合蛋白的DNA疫苗以及重组结核分枝杆菌疫苗，并与BCG相比较，评价这两种疫苗在小鼠体内的免疫学特性和抵抗MTB感染的保护力，以期寻找有效的预防和治疗TB的新型疫苗。 实验方法和结果： 1. HSP65-IL-2融合蛋白的表达及纯化。 2. HSP65-IL-2融合基因真核表达载体的构建及其表达。 3. HSP65-IL-2融合基因DNA疫苗刺激小鼠的免疫应答。 4. HSP65-IL-2融合基因DNA疫苗对MTB感染小鼠的预防保护效果。 5. HSP65-IL-2融合基因DNA 疫苗对MTB感染小鼠的治疗效果。 6. 分泌表达HSP65-IL-2融合蛋白的rM.S疫苗的构建和表达。 7. rM.S疫苗刺激小鼠的免疫应答每只小鼠皮下免疫0.2mg/100μl的rM.S或BCG，在免疫后1周和4周时，检测这两种疫苗在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫反应。 8. rM.S疫苗对MTB感染小鼠的预防保护效果。 9. 结论: 可表达HSP65-IL-2融合蛋白的DNA疫苗和其rM.S疫苗均可在小鼠体内刺激产生较强的体液和细胞免疫应答；而且rM.S疫苗可在免疫接种1周就达到免疫应答的顶峰，其反应强度超过了BCG诱导产生的，但这种免疫反应消退也较快。DNA疫苗和rM.S疫苗都可显著减少感染小鼠体内的脾肺荷菌数，表明其可抵抗MTB的感染，但这种保护作用尚不如BCG。今后我们将尝试以不同的免疫方法，途径和动物模型来进一步提高这两种疫苗的免疫原性和保护效果。