热榨花生粕中多糖提取及其抗氧化性质的研究

摘要

本文以粮油加工企业热榨油后副产物花生粕为研究对象，对花生粕多糖的纤维素酶提取、不同提取方式多糖结构组成以及其体外、体内抗氧化活性的研究进行了较为系统的论述，研究结果表明:
　　 以油脂加工企业热榨油后产生的花生粕为原料，研究花生多糖的纤维素酶法提取工艺。在单因素实验的基础上，选定提取时间、提取温度、PH值和纤维素酶浓度等4因素实施中心组合试验设计，建立以多糖提取率为考察点的二次回归方程，通过响应面分析得到优化组合条件。结果表明:在提取时间253min、提取温度43℃、pH=5.9、纤维素酶浓度为0.3％的条件下，花生多糖的提取率达到极值为6.77％。为了检验模型预测的准确性，在优化的条件下进行提取实验，花生多糖提取率为6.47％。
　　 通过对不同提取方式花生多糖理化性质及结构组成上的比较可以看出，酶提花生多糖(P1)中糖醛酸含量和硫酸根含量是四种多糖中最高的，从单糖组成上看，四种不同方式提取多糖的中性单糖组成种类较多，都是由不同单糖残基构成的杂多糖，且均不合有甘露糖。除酶提多糖外，其他几种提取方式都以葡萄糖含量为主，酶提花生多糖由葡萄糖和半乳糖构成，酸提花生多糖(P2）由鼠李糖、木糖、葡萄糖和半乳糖构成;碱提(P3)及水提(P4）花生多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖构成;从分子量上看，酶提花生多糖分子量分布为从1.08×103Da到2.39×103Da，酸提多糖从3.39×103Da到1.07×105Da，碱提多糖为从2.82×103Da到1.32×105Da，水提多糖为2.29×103Da到1.32×105Da;从红外光谱看四种多糖均具有多糖特征吸收峰且在1024、1079和1152cm-1处特征吸收为α-D-吡喃糖。
　　 研究了不同提取方式对花生多糖抗氧化活性的影响。用分光光度法研究了花生多糖在水提、酸提、碱提、酶提四种不同提取条件下对DPPH自由基、超氧基自由基、羟基自由基及还原力的测定。结果表明:不同提取方式的花生多糖均具有体外抗氧化活性且随浓度增高而增大，酶提花生多糖具有比其他几种多糖更强的抗氧化性及还原力。
　　 酶提花生多糖体内抗氧化实验表明，高浓度花生多糖（800mg/ml）对小鼠胸腺器官指数增加具有极显著影响(P＜0.01)，对心脏具有显著影响(P＜0.05)但对其他器官影响不明显，通过对小鼠肝组织及血清SOD、CAT、GSH-Px、T-AOC及MDA酶活力的测定得出，酶提花生多糖能够提高小鼠肝匀浆组织及血清中SOD、CAT、GSH-Px活力和降低MDA活力，通过半体外实验得出酶提花生多糖对肝匀浆自氧化及H2O2诱导肝匀浆脂质过氧化有抑制作用。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 引言

1．2 多糖的研究进展

1．2．1 多糖的提取

1．2．2 多糖的分离纯化

1．2．3 多糖含量的测定

1．2．4 多糖的生理功能研究

1．2．5 多糖生物活性与结构关系

1．3 花生粕综合利用研究

1．4 本课题立题依据及主要研究内容

1．4．1 立题依据

1．4．2 主要研究内容

第二章 纤维素酶法提取花生粕中多糖的研究

2．1 引言

2．2 材料与方法

2．2．1 材料

2．2．2 试剂与仪器

2．3 实验方法

2．3．1 前处理

2．3．2 样品制备

2．3．3 多糖含量测定

2．3．4 多糖含量计算

2．3．5 单因素实验

2．3．6 响应面设计

2．4 结果与分析

2．4．1 单因素试验结果

2．4．2 响应面分析法优化花生多糖提取工艺条件

2．5 结论

第三章 不同提取方式花生多糖理化性质及结构的比较

3．1 引言

3．2 材料与仪器

3．2．1 材料

3．2．2 试剂与仪器

3．3 实验方法

3．3．1 前处理

3．3．2 样品制备

3．3．3 花生多糖糖醛酸含量的测定

3．3．4 花生多糖硫酸根含量测定

3．3．5 花生多糖蛋白质含量的测定

3．3．6 不同提取方式花生多糖的单糖组成比较

3．3．7 不同提取方式花生多糖的分子量比较

3．3．8 不同提取方式花生多糖的红外光谱分析

3．3．9 不同提取方式花生多糖的紫外光谱分析

3．4 结果与分析

3．4．1 不同提取方式多糖理化性质比较

3．4．2 不同提取方式花生多糖单糖组成分析

3．4．3 不同提取方式花生多糖分子量比较

3．4．4 不同提取方式花生多糖红外光谱比较

3．4．5 不同提取方式花生多糖紫外光谱分析

3．5 结论

第四章 不同提取方法对花生体外抗氧化性的影响

4．1 引言

4．2 材料与仪器

4．2．1 材料

4．2．2 试剂与仪器

4．3 实验方法

4．3．1 前处理

4．3．2 样品制备

4．3．3 DPPH·清除实验

4．3．4 超氧阴离予(O2-)自由基清除实验

4．3．5 羟基自由基(OH·)清除实验

4．3．6 还原力测定

4．4 结果与分析

4．4．1 不同提取方式花生多糖对DPPH·清除作用

4．4．2 不同提取方式花生多糖对O2-·清除作用

4．4．3 不同提取方式花生多糖对羟基自由基清除作用

4．4．4 不同提取方式花生多糖总还原力

4．5 结论

第五章 酶提花生多糖体内抗氧化性试验

5．1 引言

5．2 材料与仪器

5．2．1 实验材料

5．2．2 试剂与仪器

5．3 实验方法

5．3．1 酶提花生多糖体内抗氧化实验

5．3．2 酶提花生多糖半体外抗氧化实验

5．4 实验结果

5．4．1 不同处理小鼠器官指数测定

5．4．2 酶提花生多糖对小鼠肝组织SOD、CAT、GSH-Px、T-AOC及MDA酶活力影响

5．4．3 酶提花生多糖对小鼠血清中SOD、CAT、GSH-Px、T-AOC酶活力及MDA含量影响

5．4．4 酶提花生多糖对肝匀浆自氧化的影响

5．4．5 酶提花生多糖对H2O2诱导肝匀浆脂质过氧化的影响

5．5 结论

全文总结

参考文献

缩略词 Abbreviations

致谢

作者简历