大蒜多糖高效提取技术及其体外抗氧化活性的研究

摘要

本论文对大蒜多糖不同提取方法进行了比较研究，利用正交试验和响应面试验设计优化了超声波复合酶法提取大蒜多糖的工艺条件，研究了大孔吸附树脂纯化粗多糖的最佳工艺，在上述最优提取及纯化条件下制备了5个不同品种的大蒜多糖，研究了不同品种大蒜多糖的体外抗氧化活性，研究结果如下: 1、研究了不同提取方法和纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶三种酶的组合方式对大蒜多糖得率的影响。结果表明复合酶酶解与超声波同时进行既可以提高大蒜多糖得率，又可以缩短提取时间，是较为经济、高效的提取方法。 2、超声波复合酶法提取大蒜多糖的最佳工艺条件为:最佳配比组合为果胶酶22.5U/g，木瓜蛋白酶160U/g,纤维素酶96U/g;超声波功率400W，超声温度49.5℃，液料比7.6∶1mL/g，提取时间16min，在此条件下，多糖平均得率为26.124％，比传统热水提取的多糖得率（鲜蒜的多糖得率14.811％）提高了76％。 3、AB-8型大孔树脂对大蒜多糖纯化的适宜工艺条件为:将大蒜多糖粗提物配置成浓度为15mg/mL的水溶液，以1.5mL/min流速上样，当上样体积达到360mL时，流出液中蛋白含量显著增加，用450mL体积的蒸馏水冲洗吸附后的大孔树脂，以2.0mL/min洗脱速度洗脱树脂柱，洗脱液中多糖的含量相对较高;纯化后得到的大蒜多糖中多糖含量可达到98.12％，比未纯化前(88.00％)提高了10％，蛋白质含量（μg/mL）降低了99.30％，多糖的颜色由原来的黄绿色变为类白色。 4、用优化得到的超声波复合酶法提取金乡白皮、金乡红皮、苍山糙蒜、苍山红皮和苍山晚蒜中的多糖，对五种大蒜多糖进行了纯化并研究了五种大蒜多糖的体外抗氧化活性，结果表明:清除DPPH自由基的IC50值依次为:4.18mg/mL、4.27mg/mL、4.02mg/mL、4.82mg/mL、2.92mg/mL;清除羟基自由基的IC50值依次为:4.57mg/mL、6.40mg/mL、4.90mg/mL、5.02mg/mL、3.99mg/mL;FRAP值依次为:0.015μmol/mg、0.0098μmol/mg、0.012μmol/mg、0.0084μmol/mg、0.0092μmol/mg。

目录

声明

摘要

第一章 前言

1．1 大蒜生物学研究进展

1．1．1 大蒜主要生物活性成分

1．1．2 氨基酸类

1．1．3 蒜酶类

1．1．4 多糖类

1．1．5 有机锗和硒

1．1．6 凝集素

1．2 药理作用

2 大蒜多糖的生物学活性

2．1 抗氧化

2．2 保护肝脏

2．3 抗病毒作用

3 大蒜多糖的提取

3．1 传统提取法

3．2 复合酶法

3．3 超声波辅助提取法

3．4 微波辅助提取法

3．5 超临界CO2萃取法

4 大蒜多糖的纯化

4．1 脱除蛋白质

4．2 脱色素

4．3 脱小分子物质

5 研究意义与内容

第二章 超声波复合酶法提取大蒜多糖的工艺研究

2．1 材料与方法

2．1．1 试验试剂与材料

2．1．2 仪器与设备

2．1．3 大蒜多糖含量和多糖得率的测定

2．1．4 提取方法和酶的选择

2．1．5 复合酶配比的优化

2．1．6 超声波提取过程的工艺优化

2．1．7 数据分析

2．2 结果与分析

2．2．1 标准曲线

2．2．2 不同提取方法对大蒜多糖得率的影响

2．2．3 不同酶组合方式对大蒜多糖得率的影响

2．2．4 复合酶配比的优化结果

2．2．5 超声波提取过程的条件优化结果

2．3 讨论

第三章 大蒜粗多糖纯化的前处理研究

3．1 材料与方法

3．1．1 试剂与材料

3．1．2 仪器和设备

3．1．3 大蒜粗多糖的制备

3．1．4 大蒜多糖三种脱蛋白方法比较

3．1．5 大孔吸附树脂多糖解析率和脱色率

3．1．6 大孔吸附树脂AB-8对大蒜多糖液中蛋白质和多糖的动态吸附和洗脱试验

3．1．7 数据分析

3．2 结果与分析

3．2．1 大蒜多糖脱蛋白工艺确定

3．2．2 大孔吸附树脂多糖解析率和脱色率研究试验

3．2．3 大孔吸附树脂AB-8动态吸附和洗脱试验结果

3．3 讨论

第四章 不同品种大蒜多糖体外抗氧化活性研究

4．1 材料与方法

4．1．1 试验材料和试剂

4．1．2 仪器和设备

4．1．3 大蒜多糖的制备

4．1．4 体外抗氧化活性的研究

4．2 结果与分析

4．2．1 不同品种大蒜多糖清除DPPH自由基的能力比较

4．2．2 不同品种大蒜多糖清除羟基自由基的能力比较

4．2．3 不同品种大蒜多糖还原能力的比较

4．3 讨论

结论

参考文献

导师组意见

致谢

作者简历