ZAG通过P-AKT/GLUT4信号通路调节脂肪细胞胰岛素抵抗的作用及机制

摘要

目的：
　　探究锌α2糖蛋白(Zinc-alpha2-glycoprotein,ZAG)对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的作用及基于P-AKT/GLUT4信号通路探讨其可能的机制。
　　方法：
　　3T3-L1脂肪细胞通过体外培养5代，诱导分化成为成熟细胞，用油红O染色法观察细胞内脂滴情况。随机分别予以生理盐水、地塞米松注射液干预48h，即为空白对照组（N组）、胰岛素抵抗模型组（IR组），IR组加入ZAG干预24h即为ZAG组。ELISA方法测定各组细胞培养液上清中肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素6(Interleukin-6,IL-6)的含量；Western Blotting法测定各组细胞中脂联素、瘦素、磷酸化丝氨/苏氨酸激酶(Phosphorylated serine/threonine kinase,P-AKT)、葡萄糖转运体4(glucose transporter4,GLUT4）蛋白表达水平；RT-PCR方法测定脂联素、瘦素、TNF-α、IL-6、AKT、GLUT4 mRNA表达水平。
　　结果：
　　（1）脂联素、瘦素蛋白及mRNA表达水平：IR组比N组脂联素降低（P<0.05）， IR组比N组瘦素增高（P<0.05）；与IR组相比，ZAG组脂联素蛋白及mRNA表达增高（P<0.05），瘦素蛋白及mRNA表达降低（P<0.05）。
　　（2） TNF-α、IL-6细胞上清液含量及mRNA表达水平：IR组比N组TNF-α、IL-6细胞上清液含量增高（P<0.05）；与IR组相比，ZAG组TNF-α、IL-6细胞上清液含量及mRNA表达降低（P<0.05）。
　　（3）P-AKT蛋白与AKT mRNA的表达水平：IR组比N组降低（P<0.05）；与IR组相比，ZAG组P-AKT蛋白及AKT mRNA表达增高（P<0.05）。
　　（4）GLUT4蛋白与mRNA的表达水平：IR组比N组降低（P<0.05）；与IR组相比，ZAG组GLUT4蛋白及mRNA表达增高（P<0.05）。
　　结论：
　　ZAG增高3T3-L1脂肪细胞脂联素蛋白及mRNA表达水平，降低瘦素、TNF-α、IL-6蛋白及mRNA表达水平，因此证实ZAG可以改善脂肪细胞胰岛素抵抗，可能与其通过提高P-AKT/GLUT4信号通路中P-AKT水平进一步提高GLUT4表达水平有关。
　　本课题为自然科学基金“山西省基础研究项目―锌α2糖蛋白参与调节胰岛素抵抗机制研究（编号：2013011048-1）”。

目录

声明

常用缩写词中英文对照表

前言

1 材料与方法

1.1材料

1.2 方法

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 3T3-L1脂肪细胞形态学改变及油红O染色

2.2 ZAG对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的脂联素、瘦素、IL-6、TNF-α蛋白及mRNA表达水平的影响

2.3 ZAG过表达对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞P-AKT蛋白及AKT mRNA表达小平的影响

2.4 ZAG过表达对细胞GLUT4蛋白及mRNA表达水平的影响

3 讨 论

4 结 论

参考文献

综述:GLUT4调节ZAG改善胰岛素抵抗的研究

致谢

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