核酸适配体荧光传感技术在环境分析中的应用研究

摘要

第一章：首先对核酸适配体与其特点、体外筛选技术以及在分析领域的应用进行了介绍，然后分别对环境内分泌干扰物双酚A、抗生素卡那霉素、毒品可卡因以及各自的分析检测手段进行了概述，重点对各自的核酸适配体传感器研究进展进行了介绍，最后阐明了论文的选题背景和研究内容。
　　第二章：双酚A（BPA）广泛应用于塑料制品和金属制品涂层等与人类饮食密切相关的领域，BPA是一种具有拟雌激素作用的内分泌干扰物，对人体健康有严重的危害。本章以小檗碱为荧光探针，利用BPA与其核酸适配体形成G-四链体结构从而减少小檗碱与核酸适配体的键合使体系荧光降低的原理分别对两条核酸适配体链进行研究，比较两种适配体体系的分析特性，选出适宜的核酸适配体并对该核酸适配体传感体系的选择性和回收率进行研究。该传感体系对BPA检测的线性范围是0μM—1300μM，检出限是32nM(S/N=3)，饮用水中的加标回收率是92.4％—102.3%，可应用于BPA的实际样品检测。
　　第三章：卡那霉素具有抑制细菌增殖和促进畜禽生长发育的作用，广泛应用于临床治疗和饲料的生产领域，卡那霉素的滥用会造成耐药菌株的出现和听力损伤等危害。本章以小檗碱为荧光探针，利用卡那霉素和其适配体形成发夹状结构从而减少小檗碱与核酸适配体的键合使体系荧光降低的原理构筑了卡那霉素核酸适配体传感体系。详细考察了适配体浓度、体系的酸度及离子强度等对卡那霉素识别检测的影响，并对实验条件进行了优化，建立了分析测定卡那霉素的传感平台，在最佳实验条件下，体系的荧光强度与卡那霉素浓度呈良好的线性关系，其线性范围是5nM—70nM，检出限为2.3nM(S/N=3)，牛奶样品中的加标回收率是98.3%—101.2%，适合应用于实际样品检测。
　　第四章：可卡因是世界公认的五大类毒品之一，由于它的滥用已造成了一系列社会问题，对可卡因进行快速、准确、灵敏检测已成为研究热点。核酸适配体与荧光光谱法结合具有检出限低、灵敏度高、特异性识别等优点而被广泛应用于分析检测领域，合适的荧光探针与适配体的选择成为研究的关键。本章以廉价免标记的小檗碱作为荧光探针，以可卡因核酸适配体的三段寡聚核苷酸链作为识别单元，利用可卡因引起寡聚核苷酸链构型的变化对小檗碱荧光发射的影响，实现了对可卡因的分析检测。详细考察了适配体浓度、体系的pH值及离子强度等对可卡因识别体系的影响，并对实验条件进行了优化，建立了分析测定可卡因的传感平台，在最佳实验条件下，体系的荧光强度与可卡因浓度呈良好的线性关系，可卡因分析检测的线性范围是为5μM—100μM，检出限为2.8μM(S/N=3)。进一步的研究表明可卡因在人体血清样品中的加标回收率是为95.6%—101.3%。

目录

第一章 绪论

1.1 核酸适配体概述

1.2核酸适配体的特点

1.3核酸适配体体外筛选技术

1.4 核酸适配体传感器的应用

1.5 双酚A及其检测

1.6卡那霉素及其分析检测

1.7 可卡因

1.8 选题背景和研究内容

第二章基于小檗碱/适配体G-四链体构型转变的双酚A荧光检测

2.1引言

2.2 实验部分

2.3. 结果与讨论

2.4 结论

第三章 基于小檗碱/核酸适配体发夹状构象转变的卡那霉素荧光检测

3.1 引言

3.2.实验部分

3.3. 结果与讨论

3.4 结论

第四章基于小檗碱/三段式核酸适配体构象Y型转变的可卡因荧光检测

4.1引言

4.2.实验部分

4.3 结果与讨论

4.4 结论

参考文献

硕士在读期间取得的研究成果

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