小麦黄花叶病毒临沂分离物全基因组序列分析及小麦抗病品种筛选

摘要

黄淮海地区是我国重要的小麦种植区。病毒病尤其土传花叶病是危害小麦最严重的病害之一。在黄淮海地区引起土传花叶病的病原为小麦黄花叶病毒（Wheatyellow mosaic virus，WYMV）和中国小麦花叶病毒（Chinese wheat mosaic virus， CWMV），这两种病毒都通过禾谷多黏菌（Polymyxa graminisL.）传播。近年来，在山东临沂小麦产区，该病呈现上升趋势。
　　为研究小麦黄花叶病毒的遗传多样性，本研究共获得2个WYMV分离物全基因组序列。序列分析发现：除去ploy（A），各分离物的RNA1均为7635 nt，开放阅读框（ORF）为7215 nt，编码2404个氨基酸；RNA2均为3651 nt，ORF为2712 nt，编码903个氨基酸。依据WYMV RNA1和RNA2编码序列进行系统进化分析发现WYMV可分为两个组，中国Ya′an和Zhouzhi分离物及Linshu、Yishui分离物的RNA1归属于II组，中国Ya′an分离物及Linshu、Yishui分离物的RNA2归属于II组，但中国Zhouzhi分离物归属于I组。这表明分离物Zhouzhi可能存在基因组重排。
　　种植抗病品种是防治小麦黄花叶病最经济有效的方法，本实验选用了334个供试小麦品种在临沂临沭小麦黄花叶病田进行抗病性鉴定试验，结果表明有鲁22，济宁16等93个小麦品种在临沂地区表现出较高抗性，适宜在临沂地区推广种植。

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1．引言

1.1小麦黄花叶病研究进展

1.1.1发生与分布

1.1.2症状

1.1.3病原及传播介体

1.1.4侵染循环

1.1.5防治措施

1.2小麦黄花叶病毒

1.2.1生物学特性

1.2.2移动

1.2.3检测

1.2.4分子生物学特性

1.3 植物病毒的遗传和进化分析

1.3.1 病毒的变异机制

1.3.2 突变

1.3.3 重组

1.3.4 重排

1.3.5 序列分析

1.4研究目的和意义

2. 材料与方法

2.1试验材料

2.1.1植物材料

2.1.2菌株、质粒

2.1.3 酶与各种生化试剂

2.1.4 寡聚核苷酸引物

2.1.5主要实验仪器

2.2试验方法

2.2.1 WYMV全序列的测定

2.2.2 5′-RACE扩增

2.2.3 序列测定与分析

2.2.4 小麦黄花叶病抗性品种筛选

3结果与分析

3.1 小麦黄花叶病毒遗传结构分析

3.1.1病毒基因组的扩增

3.1.2病毒分离物的基因组结构

3.1.3 小麦黄花叶病毒分离物序列核苷酸、氨基酸一致率

3.1.4系统发育关系分析

3.1.5遗传距离分析

3.2 不同小麦品种对小麦黄花叶病抗性分析

4 讨论

4.1小麦黄花叶病毒全基因组序列分析

4.2 抗性分析

5 结论

参考文献