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乳腺癌细胞系MDA-MB-231中HIF-1α的表达及其对细胞增殖的凋亡的作用

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论文说明:缩略词语表

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前言

1.实验材料

2.实验方法

3.实验结果

4.讨论

5.参考文献

文献综述 HIF-1在肿效瘤的凋亡和增殖中的作用

个人简历

致谢

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摘要

研究背景:HIF-1是细胞应激缺氧时所产生的转录激活因子,调节60余种基因的转录,其靶蛋白在肿瘤生长、演进和转移过程的多阶段多步骤中发挥作用。 目的:探讨正常氧状态下人乳腺癌细胞.MDA-MB-231中HIF 1α对其生长和凋亡的影响。 方法:采用Western Blot检测人乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-453、SK-BR-3、T47D、MDA-MB-468的HIF-1α的基础表达量。选择HIF-1α基础高表达的细胞系MDA-MB-23l,利用siRNA干扰技术封闭HIF-1α蛋白。连续九天对培养细胞计数,记录生长曲线,流式检测细胞周期的变化,流式结合Hoechest凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。Westem Blot检测Caspase-3蛋白、Bcl-2和Bax蛋白表达的变化。 结果:正常氧状态下人乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-453、SK-BR-3、T47D、MDA-MB-468中皆有一定的HIF-1α基础表达量,其中MDA-MB-231细胞HIF-1α表达最强。MDA-MB-231细胞经HIF-1αsiRNA干扰后生长速度明显减慢。虽然HIF-1αsiRNA干扰后的细胞没有检测到细胞周期的明显变化,但中晚期细胞凋亡数比随机干扰细胞组增多。Caspase-3活性蛋白表达量随着血清饥饿时间的延长逐渐增加,且HIF-1α的siRNA干扰组Caspase-3活性蛋白表达量更强。Bcl-2和Bax蛋白表达量在两组细胞没有什么变化。 结论:HIF-1α以抑制肿瘤细胞凋亡的方式促进肿瘤细胞的生长。

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