高生物安全性内皮抑素（endostatin）表达载体对卵巢癌模型抑制作用的动物实验研究

摘要

目的:卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,血管生成在卵巢癌的发生、发展及转移中起重要作用.以肿瘤新生血管为靶点的抗肿瘤血管生成疗法成为目前研究的热点.内皮抑素(endostatin)是近年来发现的一种内源性血管内皮细胞增殖的强效抑制剂,能特异性抑制处于增殖状态的新生血管内皮细胞,并伴有诱导凋亡的作用.本研究的目的是利用已构建的高生物安全性的endostatin真核表达载体PVAX-sEn,通过在体外研究PVAX-sEn对人脐静脉内皮细胞及对荷卵巢癌细胞裸鼠的抑制作用,为临床上卵巢癌基因介入治疗新方案的实施提供实验依据.方法:1、利用新型表皮皮生长因子受体(EGFR)介导的肿瘤细胞基因转移系统-四元复合体介导PVAX-sEn转染人卵巢癌细胞系3AO,72h收集细胞上清:2、利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测PVAX-sEn转染细胞上清对人脐静脉细胞系ECV-204的抑制作用:3、采用3AO细胞给裸鼠腋下皮下接种制备卵巢癌移植瘤动物模型,利用四元复合体介导PVAX-sEn瘤内注射,5 μg/只鼠,每周2次,共4次,观察其对卵巢癌生长的抑制作用.4、取瘤体利用流式细胞仪检测PVAX-sEn基因转染对肿瘤细胞细胞周期的影响.5、取瘤体利用免疫组化法检测肿瘤微血管密度.6、取全身重要脏器进行病理检测,观察PVAX-sEn基因转染对血管内皮细胞的影响.结论:1、重组endostatin表达载体PVAX-sEn在体外可有效抑制人脐静脉内皮细胞系ECV一204的增殖.2、PVAX-sEn可有效抑制荷瘤裸鼠的生长,并可诱导肿瘤细胞凋亡.3、PVAX-sEn的应用具有高度安全性.

目录

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符号说明

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

附图1

附图2

参考文献

致谢

攻读硕士期间科研成果及论文发表