糖尿病大鼠肾脏中CB、CC表达变化及虫草菌粉干预作用的研究

摘要

目的：研究糖尿病肾病（DN）肾组织中组织蛋白酶B（CB）及其抑制因子胱抑素C（CC）随病程进展的变化情况，并探讨虫草菌粉干预对CB、CC表达的影响。 方法：第一部分：将wistar大鼠分成正常组（N组n=30）和糖尿病组（M组 n=35），糖尿病组给予STZ55mg/kg腹腔内注射，72小时后随机血糖大于16．7 m mol/L为造模成功。两组分别在第4、8、16周各处死10只大鼠，在处死前留取24小时尿液测24h尿蛋白定量，留取血清标本测血肌酐，留取肾脏标本进行免疫组化和实时荧光定量PCR测CC，CB，CollV，FN的表达情况。第二部分：将100只健康 wistar大鼠随机分成正常组（N组 n=30）和糖尿病组（n=70），糖尿病组造模方法同第一部分，成模后随机分为模型组（M组 n=30）和治疗组（T组n=30）。并在第4、8、16周每组各处死10只大鼠，处死前留取24h尿和血标本用以测24尿白蛋白、尿肌酐和血肌酐，留取肾脏标本用免疫组化和实时荧光定量PCR检测。 结果：N大鼠肾组织中CC、CB、coIIV、FN的表达随着饲养时间的延长并没有出现明显的变化； CB在DN早期表达增加，随着病程的进展，病情的加重，其表达量下降；CoIIV、FN随着病程的进展表达逐渐增加；24h尿蛋白定量逐渐增加。第8周M组大鼠内生肌酐清除率和24h尿蛋白较第4周显著上调，免疫组化和PCR结果显示CB、CC、CoIIV、FN表达上调。第16周时CB表达下调，而CC显著上调。相关分析显示CB的表达与24小时尿蛋白、CoIIV、FN蛋白表达和mRNA表达呈负相关。 虫草菌粉干预治疗后，对各组大鼠的血糖水平影响不明显，但能延缓DN大鼠肾重和肾重指数的增加，延缓DN大鼠体重的下降。在干预的前4周，CB、CC、CoIIV、FN在N、M、T的表达无明显的差异，当干预到第8周后，各指标才出现有统计学意义的变化。较 N组，M和 T组大鼠内生肌酐清除率和24h尿蛋白第4周开始升高，免疫组化和PCR结果显示CB、CC、CoIIV、FN表达在第8周出现明显上调，M组CB在16周下调；T组的CB、CC、CoIIV，FN在前8周较M组无显著变化，CC、CoIIV、FN第16周表达下调，CB的表达上调。 结论：DN大鼠早期出现尿蛋白排泄量增加，内生肌酐清除率增加；随着病程的进展，ECM蓄积增加，DN大鼠肾脏的病理改变肾小球基底膜弥漫变厚肾小球系膜基质增多，最终形成小球硬化和纤维化；CC表达增加，使CB的表达减少，使ECM的降解减少，这是引起DN肾脏病理改变的主要原因之一。 虫草菌粉能延缓 DN大鼠的肾脏肥大，使体重下降速度减缓；并能增加 DN大鼠肾脏CB的表达，降低 CC的表达，使 ECM的蓄积减少，这是延缓 DN肾脏纤维化，延缓肾功能衰竭的作用机制之一。虫草菌粉对肾脏的保护作用与干预时间成正相关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：符号说明

声明

前言

第一部分 组织蛋白酶B和胱抑素C在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达

引言

材料与方法

结果

讨论

小结

附表

附图

参考文献

第二部分 虫草菌粉对DN大鼠肾组织中CB、CC表达的影响

引言

材料与方法

结果

讨论

小结

附表

附图

参考文献

结论

综述 组织蛋白酶B与糖尿病肾病

致谢

攻读学位期间发表的论文