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符号说明
绪论
第一部分 LHLN修饰阳离子PLA-PEG载基因纳米粒的研究
一、实验材料
1 试剂与药品
2 主要仪器
3 细胞
4 试剂配制
二、实验方法
1 DNA含量测定方法的建立
2 阳离子PLA-PEG NPs的制备
3 纳米粒的形态、粒径和表面电位的测定
4 纳米粒最优处方的筛选
5 PLA-PEG/pDNA NPs的制备及验证
6 PLA-PEG/pDNA NPs抗核酸酶能力考察
7 PLA-PEG/pDNA NPs的体外释放实验[]
8 PLA-PEG/pDNA NPs血浆稳定性考察
9 细胞毒性实验
10 体外转染实验
11 统计学分析
三、实验结果
1 DNA含量测定方法的考查结果
2 PLA-PEG NPs处方考察结果
3 PLA-PEG NPs及PLA-PEG/pDNA NPs的理化性质
4 复合物凝胶阻滞分析
5 抗核酸酶能力考察
6 血浆稳定性实验
7 体外释放实验
8 细胞毒性实验
9 体外转染实验
四、讨论
第二部分 NGR靶向阳离子型PLA-PEG纳米粒的研究
一、实验材料
1 试剂与药品
2 主要仪器
3 细胞
二、实验方法
1 材料合成
2 材料的表征
3 cNGR-PLA-PEG NPs的制备
4 酶标仪法测纳米粒表面cNGR修饰率
5 cNGR-PLA-PEG NPs/pDNA复合物的制备和优化
6 纳米粒的形态、粒径和表面电位的测定
7 cNGR-PLA-PEG NPs/pDNA抗核酸酶能力考察
8 cNGR-PLA-PEG NPs/pDNA的体外释放实验
9 血浆稳定性考察
10 细胞毒性实验
11 细胞表面CDl3受体表达
12 体外转染实验
13 统计学分析
三、实验结果
1 cNGR-PEG-PLA的结构表征
2 纳米粒的理化性质
3 纳米粒表面cNGR修饰率
4 琼脂糖凝胶电泳阻滞分析
5 抗核酸酶解能力考察
6 血浆稳定性实验
7 体外释放实验
8 细胞毒性实验
9 细胞表面CD13受体表达
10 体外转染实验
四、讨论
第三部分 NGR介导靶向载基因PLA-PEG纳米粒入胞机制研究
一、实验材料
1 试剂与药品
2 主要仪器
3 细胞
4 试剂配制
二、实验方法
1 荧光标记纳米粒的制备
2 细胞爬片技术
3 流式细胞技术
4 纳米粒体外摄取实验
5 竞争抑制实验
6 内吞抑制实验
7 统计学分析
三、实验结果
1 荧光标记纳米粒的理化性质
2 细胞表面CD13受体表达
3 纳米粒体外摄取实验
4 竞争抑制实验
5 内吞抑制剂影响实验
四、讨论
总结与展望
参考文献
致谢
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文献综述
参考文献
附图、附表
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