多聚肌酐酸抗动脉粥样硬化作用及对血管组织LOX-1表达的影响

摘要

目的：探讨血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）拮抗剂多聚肌苷酸(polyⅠ)在动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)兔动物模型中抗AS的作用以及对兔腹主动脉组织中血凝素样氧化低密度脂蛋白-1mRNA和蛋白以及hsCRP表达的影响。
　　 方法：30只6周龄、质量1.5～2.0kg的健康雄性新西兰大白兔随机分为：①普通饲料喂养组（对照组n=6）；②腹主动脉球囊拉伤后高脂饲料喂养组(高脂组n=6)；③腹主动脉球囊拉伤后高脂饲料加氟伐他汀喂养组（他汀组n=6）；④腹主动脉球囊拉伤后高脂饲料喂养加多聚肌苷酸(polyⅠ)肌肉注射组(polyⅠ组n=6)和⑤腹主动脉球囊拉伤后高脂饲料加氟伐他汀喂养同时给予多聚肌苷酸(polyⅠ)肌肉注射组(联合组n=6)。各组动物在行腹主动脉球囊拉伤术前均予以普通饲料喂养1周使其适应新的饲养环境，1周后在动物实验室内利用3％戊巴比妥钠按1ml/kg剂量进行全麻后，由右侧股动脉穿刺行腹主动脉球囊拉伤术，手术后缝合并给予抗生素防治感染，术后第1天开始给予相应的干预措施即喂养同时分别给予polyⅠ[1％的浓度1mL/(kg·d)]肌肉注射和氟伐他汀[10mg/(kg·d)]喂养。术后饲养12周后给予过量的3％戊巴比妥钠麻醉处死动物，解剖取其腹主动脉观察各组血管组织病理学变化，用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定LOX-1mRNA的表达；免疫组织化学方法测定LOX-1蛋白的表达；Elisa方法测定hsCRP的表达。
　　 结果：各模型组腹主动脉组织病理学变化：①对照组动脉内皮细胞完整，紧贴内弹力板；中层平滑肌细胞排列整齐，胞浆呈嗜酸性红染，无明显脂质沉淀；②高脂组内膜内皮细胞脱落，多数血管可见粥样斑块形成；斑块表面有纤维组织覆盖（纤维帽）；纤维帽下含大量无定形的坏死崩解产物，其内含大量胆固醇结晶、泡沫细胞和少量淋巴细胞。中膜因斑块压迫，SMC萎缩，弹力纤维破坏而变薄，中层平滑肌排列紊乱，胞浆嗜酸性的平滑肌细胞减少代之以大量胞浆淡染、充满脂质空泡的泡沫细胞，部分斑块底部和边缘出现肉芽组织/有新生血管，并伴有淋巴细胞/炎细胞浸润；③他汀组病变较高脂组明显减轻。内膜内皮细胞部分脱落，部分血管可见纤维斑块形成，表现为内膜下散在不规则隆起的斑块，斑块表面为大量SMC和细胞外基质所组成的厚薄不一的纤维帽，纤维帽下可见数量不等的泡沫细胞、SMC和细胞外基质成分。④PolyⅠ组血管内膜内皮细胞部分脱落，血管可见纤维斑块和粥样斑块并存，斑块表面有纤维组织覆盖，内膜纤维帽下含大量泡沫细胞，并伴炎细胞浸润；⑤联合组病变较高脂组减轻最明显，内膜稍增厚，可见少量泡沫细胞，内弹力板完整，中膜平滑肌排列整齐。对照组兔腹主动脉血管组织中有少量的LOX-1蛋白及mRNA的表达；高脂组表达最明显；他汀组及联合组LOX-1蛋白和mRNA的表达较高脂组明显减少(P＜0.01)，polyⅠ抑制LOX-1蛋白和mRNA表达的作用较高脂组无统计学意义(P＞0.05)；高脂组hsCRP表达的量较其它组别均明显增多(P＜0.01)，对照组有极少量的表达，他汀组较polyⅠ组表达少，联合组较他汀组表达较少，但差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　 结论：(1)PolyⅠ组可能具有一定的抑制AS发生发展及hsCRP表达的作用，但其抑制LOX-1蛋白和mRNA表达作用不显著。
　　 (2)氟伐他汀具有明显的抗AS作用，显著地抑制血管组织中LOX-1蛋白及mRNA的表达；同时具有抑制hsCRP表达等抗炎作用。
　　 (3)PolyⅠ联合氟伐他汀较单用氟伐他汀抗AS的作用明显增强，PolyⅠ的抗动脉粥样硬化及抑制hsCRP表达的作用仍需更多的实验来研究。