循环miRNA-221/222与急性冠脉综合征患者冠脉病变严重程度的相关性研究

摘要

研究目的：
　　(1)采用病例对照研究对比ACS患者和对照组循环miRNA-221/222相对表达水平的差别;
　　(2)探讨循环miRNA-221/222与冠状动脉病变严重程度及与ACS发生的相关性;
　　(3)讨论循环miRNA-221/222在预测ACS发病风险中的价值。
　　研究方法：
　　本次研究于2016年10月至2017年10月连续收集于山东大学齐鲁医院行冠状动脉造影患者500例，严格按照入选标准及排除标准共筛选出338例受试者，其中ACS患者267例（包括UA患者191例和AMI患者76例），对照组71例。收集受试者一般情况、既往病史、实验室检查、心电图、用药史等资料。于冠状动脉造影术中肝素化前抽取右侧桡动脉或股动脉血液5ml，采用血浆miRNA提取分离试剂盒提取血浆总RNA，应用RT-qRCR技术并采用外参法获取循环miRNA-221/222的相对表达水平。
　　应用SPSS19.0、Graphpad Prism5.0及MedCalc15.2进行统计学分析。连续变量用平均值±标准差(mean±SD)表示，运用独立样本t检验或非参数秩和检验比较两组间差异，运用单因素方差分析进行多组间比较。分类变量用构成比表示，运用卡方检验比较两组或多组间差异。运用Pearson或Spearman相关分析进行两变量之间的相关性分析。运用多因素线性回归分析循环miRNA-221/222与Gensini评分的线性关系。运用Logistic回归模型分析循环miRNA-221/222与ACS发生的关联性。运用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve，ROC curve)评价循环miRNA-221/222对冠状动脉狭窄≥50％的诊断价值。
　　研究结果：
　　(1)循环miRN A-221/222相对表达水平的组间比较:与对照组相比，ACS组循环miRNA-221/222相对表达水平均升高，差异均具有统计学意义（P均＜0.05）;与对照组相比，不稳定型心绞痛(unstable angina，UA)组及急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)组循环miRNA-221/222相对表达水平均升高，差异均具有统计学意义（P均＜0.05），但UA组和AMI组之间循环miRNA-221/222差异无统计学意义（P均＞0.05）。
　　(2)控制混杂因素后循环miRNA-221/222相对表达水平的组间比较:循环miRNA-221与谷丙转氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、利尿剂、硝酸酯类、低分子肝素(low molecular weight heparin，LMWH)呈正相关（P均＜0.05），与高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）、β受体阻滞剂(β-blocker)、他汀类呈负相关（P均＜0.05）。控制上述混杂因素后，与对照组相比，ACS组循环miRNA-221相对表达水平升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）;与对照组相比，UA组循环miRNA-221相对表达水平升高，差异具有统计学意义(P＜0.05)，但对照组与AMI组、UA组与AMI组之间循环miRNA-221差异均无统计学意义（P均＞0.05）。循环miRNA-222与高血压史、硝酸酯类、LMWH呈正相关（P均＜0.05），与男性、吸烟史、HDL、β-blocker呈负相关（P均＜0.05）。控制上述混杂因素后，与对照组相比，ACS组循环miRNA-222相对表达水平升高，差异具有统计学意义(P＜0.05);AMI组循环miRNA-222高于对照组及UA组，差异均具有统计学意义（P均＜0.05），但是对照组与UA组之间循环miRNA-222差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　(3)循环miRNA-221/222相对表达水平与Gensini评分的关系:以Gensini评分为因变量，以临床基线资料、冠心病危险因素、实验室检查、用药史、循环miRNA-221为自变量，进行多元逐步线性回归，年龄、既往心梗史、白细胞(white blood cell，WBC)、氯吡格雷/替格瑞洛、血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitor，ACEI)/血管紧张素受体阻滞剂(angiotensin receptor blocker，ARB)、β-blocker、循环miRNA-221进入回归方程，循环miRNA-221（β=0.100，P=0.041）与Gensini评分呈正性线性相关。以Gensini评分为因变量，以临床基线资料、冠心病危险因素、实验室检查、用药史、循环miRNA-222为自变量，进行多元逐步线性回归，年龄、WBC、氯毗格雷/替格瑞洛、ACEl/ARB、β-blocker、循环miRNA-222进入回归方程，循环miRNA-222（β=0.100，P=0.047）与Gensini评分呈正性线性相关。
　　(4)循环miRNA-221/222相对表达水平与疾病发生的关系:①ACS危险因素Logistic回归模型:以ACS作为因变量，以性别、年龄、收缩压(systolic blood pressure，SBP)、舒张压(diastolic blood pressure，DBP)、吸烟史、高血压史、糖尿病史、冠心病家族史、总胆固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、HDL、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)、空腹血糖(fasting blood glucose，FBG)、同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)、循环miRNA-221等作为自变量，进行多因素逐步Logistic回归分析，循环miRNA-221进入回归方程，表明循环miRNA-221为ACS发病的危险因素(OR值1.159，95％CI:1.033-1.299，P=0.012);以ACS作为园变量，以性别、年龄、SBP、DBP、吸烟史、高血压史、糖尿病史、冠心病家族史、TC、TG、HDL、LDL、FBG、Hcy、循环miRNA-222等作为自变量，进行多因素逐步Logistic回归分析，循环miRNA-222进入回归方程，表明循环miRNA-222为ACS发病的危险因素（OR值1.132，95％CI:1.024-1.251，P=0.015）。②UA及AMI危险因素Logistic回归模型:以UA及AMI作为因变量，以性别、年龄、SBP、DBP、吸烟史、高血压史、糖尿病史、冠心病家族史、TC、TG、HDL、LDL、FBG、Hcy、循环miRNA-221等作为自变量，进行多因素逐步Logistic回归分析，循环miRNA-221进入回归方程，表明循环miRNA-221既是UA发病的危险因素（OR值1.154，95％CI:1.031-1.290，P=0.012），也是AMI发病的危险因素（OR值1.153，95％CI:1.030-1.290，P=0.013）;以UA及AMI作为因变量，以性别、年龄、SBP、DBP、吸烟史、高血压史、糖尿病史、冠心病家族史、TC、TG、HDL、LDL、FBG、Hcy、循环miRNA-222等作为自变量，进行多因素逐步Logistic回归分析，循环miRNA-222进入回归方程，表明循环miRNA-222既是UA发病的危险因素（OR值1.120，95％CI:1.018-1.232，P=0.020），也是AMI发病的危险因素（OR值1.132，95％CI:1.028-1.245,P=0.011）。
　　(5)循环miRNA-221/222相对表达水平诊断冠状动脉狭窄≥50％的价值:绘制ROC曲线，获取循环miRNA-221/222诊断冠状动脉狭窄程度≥50％的曲线下面积(area under curve，AUC)，分析循环miRNA-221、miRNA-222的AUC及95％可信区间（confidence interval，CI）分别为0.605(0.550-0.657)、0.643(0.589-0.694)，具有一定的诊断价值。
　　研究结论：
　　(1)ACS患者循环miRNA-221/222相对表达水平均显著升高;
　　(2)循环miRNA-221/222相对表达水平与冠状动脉病变严重程度呈正相关;
　　(3)循环miRNA-221/222是ACS发生的危险因素，有可能成为ACS发病风险预测的生物学标志物;
　　(4)循环miRNA-221/222有望成为诊断冠状动脉狭窄≥50％的新型生物学标志物。

目录

声明

摘要

符号说明

前言

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

1．3 实验结果计算

1．4 统计学分析

2 研究结果

2．1 受试者临床资料比较

2．2 循环miRNA-221／222相对表达水平的组间比较

2．3 循环miRNA-221／222相对表达水平与Gensini评分的关系

2．4 循环miRNA-221／222相对表达水平与ACS、UA及AMI发病的关系

2．5 循环miRNA-221／222相对表达水平预测冠状动脉狭窄≥50％的价值

3 讨论

3．1 心血管疾病的流行病学

3．2 急性冠脉综合征的病理生理机制

3．3 急性冠脉综合征的诊断方法

3．4 miRNA的简介

3．5 miRNA-221／222与动脉粥样硬化发生发展的关系

3．6 miRNA-221／222与急性冠脉综合征

3．7 创新点与限制性

4 结论

附表附图

参考文献

致谢