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摘要
符号说明
第一部分前言
1．1基因编辑技术的发展及意义
1．2 CRISPR／Cas编辑系统的结构以及原理
1．3 CRISPR／Cas9在植物研究中应用及进展
1．4 CRISPR／Cas9系统在玉米中的应用
1．5基因枪在植物遗传转化中的应用
1．6 ZmThx20基因和ZmPTF1基因研究进展
1．7研究目的与意义
2．1植物材料
2．2试剂和耗材
2．3培养基
2．4 sgRNA设计
2．5 CRISPR／Cas9载体的构建
2．6基因枪轰击法转化玉米幼胚愈伤组织
2．7转基因玉米的筛选
2．8 CTAB法小量提取玉米基因组DNA
2．9 PCR引物设计和检测体系以及程序
2．10侧流式转基因检测试纸条检测筛选标记基因bar
2．11 CRISPR／Cas9编辑效率的检测
2．12基因编辑植株籽粒形态学观测
2．13基因编辑植株的分子检测
第三部分实验结果和分析
3．1 sgRNA的设计以及植物表达载体构建
3．2基因枪介导的玉米愈伤组织转化
3．3转基因植株的检测
3．4转基因玉米植株的基因编辑检测
3．5基因编辑植株形态学观测
3．6基因编辑植株靶基因表达的分子检测
第四部分总结与展望
4．1 CRISPR／Cas9系统介导玉米基因组编辑
4．2 CRISPR／Cas9系统编辑玉米基因的效率
4．3 CRISPR／Cas9系统在玉米中的应用前景
4．5影响玉米转基因效率的因素的推测
4．6论文后续的展望
参考文献
附录
致谢
攻读学位期间发表的学术论文目录
学位论文评阅及答辩情况表
