Ghrelin在糖尿病小鼠摄食调节与能量平衡中的作用

摘要

内源性Ghrelin在STZ诱导的糖尿病小鼠多食中的作用 Ghrelin由胃底部粘膜细胞合成并分泌，启动进食并促进食欲的重要调节因子。本实验目的是：采用链脲菌素(STZ)诱导糖尿病小鼠，用Ghrelin受体拈抗剂，研究内源性Ghrelin参与糖尿病多食调节的机理。 方法：1、24只NMRI小鼠分为两组，每组12只，其中一组给予STZ诱导成为糖尿病小鼠模型，给予生理盐水或Ghrelin受体拈抗剂(D-Lys3-GHRP-6)，比较组间的血浆Ghrelin，血糖，腴高血糖素水平，摄食，体重和脂肪垫的变化。2、用免疫荧光组化技术检测下丘脑Ghrelin，NPY，α-MSH和Orexin等神经肽免疫活性细胞，用激光共聚焦技术分析下丘脑各神经肽核团摄食肽和厌食肽免疫活性的表达。3、放射免疫实验检测胰高血糖素及Ghrelin在血清中的含量。实验结果显示：1、STZ糖尿病小鼠比正常对照组小鼠的血浆Ghrelin水平显著升高。2、糖尿病小鼠的24小时(p＜0.05)及2小时(p＜0.01)摄食增加，给予Ghrelin受体阻断剂治疗，可以23％降低24h和54％降低2h的摄食量，且能够降低(33％)糖尿病小鼠的血糖。3、糖尿病小鼠NPY免疫阳性神经元在下丘脑弓状核的表达增加了2.4倍(p＜0.001)，而α-MSH免疫阳性神经元降低了1.7倍(p＜0.05)，D-Lys3-GHRP-6可以使NPY及α-MSH的表达恢复正常。4、糖尿病组小鼠血浆Ghrelin水平显著高于正常对照组(p＜0.05)(糖尿病组：1266±200pg/ml；正常对照组：576±108pg/ml;)，Ghrelin受体阻断剂使正常组Ghrelin水平(升至1240±246pg/ml)及糖尿病组血浆Ghrelin水平(升至1570±373pg/m1)皆有升高(p＜0.05)。糖尿病小鼠胃泌酸粘膜层Ghrelin阳性细胞比正常对照组显著增加，给予D-Lys3-GHRP-6后，糖尿病组及对照组Ghrelin阳性细胞表达均加强。5、糖尿病组小鼠血浆胰高血糖水平显著高于正常小鼠(p＜0.05)，Ghrelin受体阻断剂可以使增高的胰高血糖水平恢复正常，但并不影响正常小鼠胰高血糖素水平。结论：Ghrelin是重要的内源性促进食欲的神经肽，糖尿病的多食是由于Ghrelin激活下丘脑NPY神经元，降低α-MSH神经元活性所致。 STZ诱导的Ghrelin基因敲除糖尿病小鼠摄食的调节 STZ诱导的糖尿病小鼠血浆Ghrelin水平显著升高，腹腔注射Ghrelin受体阻断剂可显著降低24小时及2小时(10am-12am)糖尿病小鼠摄食。Ghrelin在调节糖尿病小鼠的多食中起着重要的作用。为进一步证实Ghrelin是促进糖尿病小鼠食欲的重要调节因子。 本实验目的是：1、用Ghrelin基因敲除(Ghrelin-/-)及Ghrelin野生型(Ghrelin+/+)STZ糖尿病小鼠，观察比较Ghrelin基因绝对缺乏时，糖尿病小鼠的摄食及其他相关指标的变化。2、检测其下丘脑摄食调节肽NPY，Orexin及α-MSH神经元的活性表达，探讨Ghrelin调节摄食的中枢机制。方法：1、用STZ诱导Ghrelin野生型(Ghrelin+/+)和Ghrelin基因敲除(Ghrelin-/-)(n=12)小鼠制作糖尿病模型，检测血浆血糖，胰高血糖素，摄食，体重和脂肪垫的变化；2、用免疫荧光组化技术检测下丘脑Ghrelin，NPY，α-MSH和Orexin等神经肽免疫活性细胞，用激光共聚焦技术分析下丘脑各神经肽核团摄食肽和厌食肽免疫活性的表达。3、放射免疫实验检测血浆胰高血糖素。实验结果显示：1、与Ghrelin+/+糖尿病小鼠组比较，Ghrelin-/-糖尿病小鼠组的多食反应减弱，其24小时最大摄食增加量(70％)明显少于Ghrelin+/+糖尿病小鼠的摄食增加量(141％)(p＜0.05)；2、Ghrelin-/-糖尿病小鼠体重减少较Ghrelin+/+糖尿病小鼠更加明显(p＜0.05)，比Ghrelin+/+糖尿病组多减少了12.4％；3、Ghrelin-/-糖尿病小鼠下丘脑NPY免疫阳性神经元数没有明显的增加；在健康对照Ghrelin-/-小鼠，其α-MSH免疫阳性神经元数(1128±92/mm2)高于健康对照Ghrelin+/+鼠的α-MSH免疫阳性细胞数(745±52/mm2)。在两种基因型(Ghrelin+/+，Ghrelin-/-)的糖尿病小鼠中，α-MSH的表达均减少(57.3％Ghrelin+/+；49.7％Ghrelin-/-)。结论：Ghrelin-/-糖尿病小鼠摄食明显低于Ghrelin+/+糖尿病小鼠。Ghrelin-/-糖尿病小鼠不伴有下丘脑NPY的表达显著增加，但α-MSH降低，因此导致Ghrelin-/-糖尿病小鼠食欲轻度增加。 Ghrelin受体基本活性信号对胃运动的调节作用 背景和目的：新近首次发现的生长激素促分泌剂受体(GHS-R)的内源性配体是一个由28个氨基酸组成，名为Ghrelin的多肽，它与生长激素促分泌剂受体(GHS-R)结合，增强胃肠运动，促进胃酸分泌，提高食欲，增加体重。在众多的生长激素促分泌剂中，GHRP-6具有最强的促进生长激素分泌的作用。目的：1、本实验应用改良的14C辛酸呼吸试验法测定清醒小鼠的胃运动，探讨Ghrelin，GHS-R激动剂GHRP-6和GHS-R反激动剂[D-Arg1，D-phe5，D-Trp7,9，Leu11]-物质(一种P物质拟似剂)对胃排空的作用与机制；2、并进一步研究糖尿病小鼠胃动力的改变与Ghrelin受体基本活性调定点变化的关系。

目录

文摘

英文文摘

第一章前言

第二章内源性Ghrelin在STZ诱导的糖尿病小鼠多食中的作用

第三章STZ诱导的Ghrelin基因敲除糖尿病小鼠摄食的调节

第四章Ghrelin受体基本活性信号对胃运动的调节作用

第五章GHRP-6对下丘脑c-Fos表达的影响

第六章综述：关于Ghrelin脑肠肽---Ghrelin的发现及其生理病理作用

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