不同能量平衡状态下瘦素及瘦素受体在小鼠肝细胞损伤中的作用机制

摘要

目的 探讨在不同能量平衡状态下瘦素(leptin)及瘦素受体(leptin receptor,LEPR)参与肝细胞损伤的作用机制研究.方法 选取4周龄FVB/N雌性小鼠18只,分为3组:Mex3c+/-突变组(文中简称Mex3c+/-组,n=6),HFD组(给予高脂饮食,n=6)和Control组(给予普通饲料,n=6),全部饲养至14周龄.苏木素-伊红染色观察肝脏组织;RT-PCR检测肝脏组织LEPR的mRNA相对量;Western blotting、免疫组化染色检测肝脏组织leptin、LEPR蛋白表达;ELISA检测三组小鼠血清中可溶性LEPR、ALT、AST、TBIL和DBIL浓度.结果 (1)小鼠14周龄体质量:与Control组[(18.20±1.04)g]相比,Mex3c+/-组体质量降低[(15.23±0.57)g,P<0.01],HFD组体质量增加[(21.56±2.56)g,P<0.01].(2)病理学染色结果:与Control组相比,HFD组肝细胞存在大脂滴,胞质减少;Mex3c+/-组肝细胞内有脂滴.(3)肝脏组织LEPR mRNA表达水平:与Control组(1.01±0.02)比较,Mex3c+/-组LEPR mRNA(1.44±0.30)略升高,但无统计学差异(P>0.05);HFD组LEPR mRNA(1.90±0.37)升高,差异有统计学意义(P<0.05).(4)肝脏组织leptin、LEPR蛋白表达水平:免疫组化显示,3组肝脏组织leptin蛋白表达水平无统计学差异(P>0.05);与Control组相比,Mex3c+/-组、HFD组均高表达LEPR蛋白(P<0.01).Western blotting结果显示,3组肝脏leptin蛋白表达水平亦无统计学差异(P>0.05);与Control组[(2011.60±589.07)pg/mL]相比,Mex3c+/-组血清中可溶性LEPR浓度[(1873.62±643.49)pg/mL]略下降,但差异无统计学意义(P>0.05),HFD组明显升高[(7264.33±1640.83)pg/mL,P<0.01].(5)肝功能:与Control组比,Mex3c+/-组血清ALT、AST水平降低(P<0.05),但TBIL、DBIL水平升高(P<0.05);HFD组血清ALT、AST、TBIL和DBIL水平均升高(P<0.05).结论 在不同能量平衡调节下通过诱导leptin-LEPR信号通路参与肝细胞损伤的过程,在正负能量状态下肝脏组织中LEPR都会有所升高,表明Mex3c+/-诱导的负能量状态和HFD诱导的正能量状态都会对肝细胞产生损伤作用.