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钝顶螺旋藻多糖的提取工艺和其对果蝇抗氧化能力的影响

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前言

1螺旋藻概述

2螺旋藻多糖的研究现状

2.1螺旋藻多糖结构的研究进展

2.2螺旋藻多糖生理活性的研究进展

1试验材料

1.1材料

1.2主要仪器设备

1.3主要药品与试剂

1.4主要试剂配制

2试验方法

2.1螺旋藻多糖提取

2.1.1水提法提取螺旋藻多糖单因素试验

2.1.2水提法提取螺旋藻多糖的正交试验

2.1.3多糖的率的测定

2.1.4蛋白含量测定

2.1.5多糖纯化

2.1.6脱色

2.2果蝇抗氧化能力研究

2.2.1果蝇取样及匀浆液制备

2.2.2果蝇抗氧化能力各指标测定

2.2.3数据统计分析

3结果与分析

3.1螺旋藻多糖的提取

3.1.1水提法提取螺旋藻多糖单因素试验

3.1.2螺旋藻粗多糖液蛋白的脱除

3.1.3脱色

3.2螺旋藻多糖的抗氧化作用

3.2.1性别与浓度对酶活性影响

4讨论

4.1螺旋藻多糖的提取

4.2螺旋藻粗多糖蛋白的脱除研究

4.3螺旋藻多糖的脱色

4.4螺旋藻抗氧化作用的研究

5 结论

参考文献

附录 缩略词中英文对照

致谢

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摘要

螺旋藻多糖(PSP)是一种天然生物活性物质,参于细胞的多种调节作用,具有抗氧化、抗肿瘤、抗辐射、调节机体免疫功能,在降低血糖、血脂以及促进细胞生长方面都有较好的作用。
   本研究以内蒙古鄂尔多斯高原碱湖钝顶螺旋藻S1和非洲Chad湖钝顶螺旋藻S2两个不同生态种为材料,采用水提法提取了S2螺旋藻粗多糖,从提取时间、提取温度、料液比和pH值四个因素出发,设置三个水平,优化了提取工艺。结果表明水提法提取螺旋藻多糖的最佳工艺参数为提取时间8 h,提取温度80℃,水料比25∶1,提取液pH值12。正交试验结果表明TCA和Sevage两种方法对螺旋藻多糖蛋白脱除作用,在TCA浓度8%,螺旋藻多糖提取液与TCA的体积比1∶1,蛋白脱除次数3时TCA法的脱除效果最好;氯仿与正丁醇体积比4∶1,螺旋藻多糖提取液与Sevgae液的体积比2∶1,蛋白脱除次数为2时Sevage法的脱除效果最好;将试验结果进行加权评分后发现TCA法脱除螺旋藻多糖蛋白的效果优于Sevage法。采用活性炭对藻多糖进行脱色,以活性炭添加量、脱色时间和脱色温度三个因素设计正交试验,结果显示温度对脱色效果影响最大,筛选出的最佳脱色条件为脱色温度40℃,活性炭添加量1.5%,脱色时间50 min。
   进而以黑腹果蝇为试验动物,在培养基中添加提取的螺旋藻粗多糖培养果蝇,并设计了A、B、C、D、E五组,A为基础培养基的对照组,B为添加0.1%S2多糖的低剂量组,C为添加0.3%S2多糖的中剂量组,D为添加0.5%S2多糖的高剂量组,E为添加0.3%S1多糖的中剂量组,测定雌雄果蝇体内过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CTA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性和丙二醛(MDA)含量五个指标,研究螺旋藻多糖的抗氧化作用及相关机理。结果显示,除MDA含量显著下降外,其余各指标均提高,试验组与对照组差异达到显著水平或极显著水平,推测螺旋藻多糖通过提高一系列抗氧化酶活性,减少脂质过氧化作用,可能是其抗氧化、抗衰老的途径之一。

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